產(chǎn)品簡(jiǎn)介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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貨號(hào) | GOY-01D2110 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱(chēng) | Recombinant Protein Kinase D1 (PKD1) |
物種 | Homo sapiens (Human,人) |
上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
—— 銷(xiāo)售熱線(xiàn) ——
15026555973 |
參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間:2023-03-17 11:35:14瀏覽次數(shù):153
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
---|---|---|---|
貨號(hào) | GOY-01D2110 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱(chēng) | Recombinant Protein Kinase D1 (PKD1) |
物種 | Homo sapiens (Human,人) |
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng) | 物種 | 貨號(hào) |
蛋白激酶D1(PKD1)重組蛋白人 | Homo sapiens (Human,人) | GOY-01D2110 |
英文名稱(chēng):Recombinant Protein Kinase D1 (PKD1)
PRKD1; PRK-D1; PKC-MU; PKCM; PK-D1; PRKCM; Protein Kinase C,Mu
型號(hào):GOY-01D2110
酶與激酶
代謝通路
發(fā)育科學(xué)
物種:Homo sapiens (Human,人)
來(lái)源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位::Cytoplasm. Cell membrane. Golgi apparatus, trans-Golgi network.
預(yù)測(cè)分子量:30.2kDa
實(shí)際分子量:-(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))
片段與標(biāo)簽:Thr651~Gln876 (Accession # Q15139) with
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 95%
等電點(diǎn):6.5
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻?hù)要求提供含純化標(biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
二胺氧化酶(ABP1)活性蛋白英文名稱(chēng):Active Amiloride Binding Protein 1 (ABP1)AOC1; DAO; KAO; Histaminase; Kidney amine oxidase; Diamine Oxidase; Amiloride-sensitive amine oxidase; Amine oxidase copper domain-containing protein 1物種:Human,人
腺苷酸環(huán)化酶1(ADCY1)重組蛋白英文名稱(chēng):Recombinant Adenylate Cyclase 1, Brain (ADCY1)AC1; ATP pyrophosphate-lyase 1; Ca(2+)/calmodulin-activated adenylyl cyclase; Adenylate cyclase type I物種:Human,人
AMP激活蛋白激酶γ2(PRKAg2)重組蛋白英文名稱(chēng):Recombinant Protein Kinase, AMP Activated Gamma 2 (PRKAg2)AAKG; AAKG2; CMH6; H91620p; WPWS; 5'-AMP-activated protein kinase subunit gamma-2物種:Mouse,小鼠
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人皮下脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基香菇 Lentinula edodes
(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定,二鈉鹽 Ticarcillin disodium salt
戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus293(人胚腎細(xì)胞)
RGD肽 質(zhì)量規(guī)格:>97%,integrin抑制劑 Arg-Gly-Asp
EL-4全細(xì)胞裂解液苜蓿中華根瘤菌
促胰液素;胰泌素 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Secretin Acetate
青春雙岐桿菌 Bifidobacterium adolescentis同心青霉 Penicillium concentricum
肝素鋰 質(zhì)量規(guī)格:>150IU/MG,BR Heparin lithium
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeRA, 大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞
質(zhì)量規(guī)格:AR Thymol
黃綠鏈霉菌 Streptomyces flavoviridis嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus
質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR Pranoprofen
成纖維細(xì)胞里氏木霉 Trichoderma reesei
(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>97%,標(biāo)準(zhǔn)品 Pranoprofen
宇佐美曲霉B變種 Aspergillus usamii var. B1人破骨細(xì)胞培養(yǎng)基
牛血清白蛋白(BSA);牛血清白蛋白組分五 質(zhì)量規(guī)格:Purity>98%,分子生物學(xué)級(jí) Albumin(bovine fraction V);BSA
蛋白激酶D1(PKD1)重組蛋白人250mL Carbonate Buffer(鹽緩沖液),0.5M,pH9.6 Carbonate Buffer,0.5M,pH9.6 常溫保存
2 ug pMal-p2E pMal-p2E 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
1瓶 Jurkat D細(xì)胞株 Jurkat D 低溫運(yùn)輸和保存
人真胰島素(TI)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
100mg 肌球蛋白 Myoglobin -20℃保存
猴子孕激素/孕酮(PROG)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
2 ug pVLT33 pVLT33 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
人α-防御素4(NP-4)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
80KU DNA ,Ⅱ型 Deoxyribonuclease Ⅱ(Porcine Spleen) -20℃保存
250mL MOPS Buffer,1.0M,pH7.0 MOPS Buffer,1.0M,pH7.0 常溫保存
250mL Triton Permeating Solution in PBS,10X Triton Permeating Solution in PBS,10X 常溫保存