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蛋白激酶D1(PKD1)重組蛋白人

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更新時(shí)間:2023-03-17 11:35:14瀏覽次數(shù):153

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號(hào) GOY-01D2110 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱(chēng) Recombinant Protein Kinase D1 (PKD1)
物種 Homo sapiens (Human,人)    
蛋白激酶D1(PKD1)重組蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品:血小板趨化因子7蛋白抗體 英文名稱(chēng):CXCL7/NAP-2/PPBP 0.1ml干擾素誘導(dǎo)T細(xì)胞趨化因子抗體 英文名稱(chēng):CXCL11 0.2ml凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體 英文名稱(chēng):CARD12 0.1ml

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱(chēng)

物種

貨號(hào)

蛋白激酶D1(PKD1)重組蛋白人

Homo sapiens (Human,人)

GOY-01D2110

 

 

英文名稱(chēng):Recombinant Protein Kinase D1 (PKD1)

PRKD1; PRK-D1; PKC-MU; PKCM; PK-D1; PRKCM; Protein Kinase C,Mu

型號(hào):GOY-01D2110

酶與激酶

代謝通路

發(fā)育科學(xué)

物種:Homo sapiens (Human,人)

來(lái)源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位::Cytoplasm. Cell membrane. Golgi apparatus, trans-Golgi network.

預(yù)測(cè)分子量:30.2kDa

實(shí)際分子量:-(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽:Thr651~Gln876 (Accession # Q15139) with

緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

性狀:凍干粉

純度:> 95%

等電點(diǎn):6.5

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

圖片3.png
蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻?hù)要求提供含純化標(biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:

二胺氧化酶(ABP1)活性蛋白英文名稱(chēng):Active Amiloride Binding Protein 1 (ABP1)AOC1; DAO; KAO; Histaminase; Kidney amine oxidase; Diamine Oxidase; Amiloride-sensitive amine oxidase; Amine oxidase copper domain-containing protein 1物種:Human,人

腺苷酸環(huán)化酶1(ADCY1)重組蛋白英文名稱(chēng):Recombinant Adenylate Cyclase 1, Brain (ADCY1)AC1; ATP pyrophosphate-lyase 1; Ca(2+)/calmodulin-activated adenylyl cyclase; Adenylate cyclase type I物種:Human,人

AMP激活蛋白激酶γ2(PRKAg2)重組蛋白英文名稱(chēng):Recombinant Protein Kinase, AMP Activated Gamma 2 (PRKAg2)AAKG; AAKG2; CMH6; H91620p; WPWS; 5'-AMP-activated protein kinase subunit gamma-2物種:Mouse,小鼠

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

人皮下脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基香菇 Lentinula edodes

(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定,二鈉鹽 Ticarcillin disodium salt

 戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus293(人胚腎細(xì)胞)

RGD肽 質(zhì)量規(guī)格:>97%,integrin抑制劑 Arg-Gly-Asp

 EL-4全細(xì)胞裂解液苜蓿中華根瘤菌

促胰液素;胰泌素 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Secretin Acetate

 青春雙岐桿菌 Bifidobacterium adolescentis同心青霉 Penicillium concentricum

肝素鋰 質(zhì)量規(guī)格:>150IU/MG,BR Heparin lithium

 釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeRA, 大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞

 質(zhì)量規(guī)格:AR Thymol

 黃綠鏈霉菌 Streptomyces flavoviridis嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus

 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR Pranoprofen

 成纖維細(xì)胞里氏木霉 Trichoderma reesei

(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>97%,標(biāo)準(zhǔn)品 Pranoprofen

 宇佐美曲霉B變種 Aspergillus usamii var. B1人破骨細(xì)胞培養(yǎng)基

牛血清白蛋白(BSA);牛血清白蛋白組分五 質(zhì)量規(guī)格:Purity>98%,分子生物學(xué)級(jí) Albumin(bovine fraction V);BSA

蛋白激酶D1(PKD1)重組蛋白人250mL Carbonate Buffer(鹽緩沖液),0.5M,pH9.6   Carbonate Buffer,0.5M,pH9.6   常溫保存

2 ug pMal-p2E pMal-p2E 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

1瓶 Jurkat D細(xì)胞株 Jurkat D 低溫運(yùn)輸和保存

人真胰島素(TI)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

100mg 肌球蛋白 Myoglobin -20℃保存

猴子孕激素/孕酮(PROG)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

2 ug pVLT33 pVLT33 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

α-防御素4(NP-4)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

80KU DNA ,Ⅱ型 Deoxyribonuclease Ⅱ(Porcine Spleen) -20℃保存

250mL MOPS Buffer,1.0M,pH7.0   MOPS Buffer,1.0M,pH7.0   常溫保存

250mL Triton Permeating Solution in PBS,10X Triton Permeating Solution in PBS,10X 常溫保存

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