詳細介紹
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標蛋白及純化報告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag)或切除純化標簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達90%以上。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號 |
溶血磷脂酶Ⅰ(LYPLA1)重組蛋白小鼠 | Mus musculus (Mouse,小鼠) | GOY-01D2326 |
英文名稱:Recombinant Lysophospholipase I (LYPLA1)
APT1; LPL1; LYSOPLA; Acyl-Protein Thioesterase 1
型號:GOY-01D2326
酶與激酶
物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
來源:原核表達
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位::n/a
預(yù)測分子量:28.4kDa
實際分子量:-(差異分析請參閱說明書)
片段與標簽:Met1~Asp230 with
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 95%
等電點:-
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
芳基酯酶A(ARSA)重組蛋白英文名稱:Recombinant Arylsulfatase A (ARSA)MLD; ASA; Metachromatic Leucodystrophy; Cerebroside-sulfatase物種:Human,人
永離有絲分裂基因A相關(guān)激酶2(NEK2)重組蛋白英文名稱:Recombinant Never In Mitosis Gene A Related Kinase 2 (NEK2)HsPK 21; HsPK21; NEK2A; NLK1; NimA-like protein kinase 1; Serine/threonine-protein kinase Nek2物種:Mouse,小鼠
細胞色素P450 17A1(CYP17A1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Cytochrome P450 17A1 (CYP17A1)S17aH; CPT7; P450C17; 17-Alpha-Hydroxylase; 17-alpha-hydroxyprogesterone aldolase/17,20-Lyase; Steroid 17-alpha-monooxygenase; Cytochrome P450,Family 17,Subfamily A,Polypeptide 1物種:Mouse,小鼠
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeMLA144臂猿淋巴瘤細胞
豆腐果苷(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 Helicid
香菇 Lentinula edodes地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis
豆甾(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:95%,標準品,大豆來源 Stigmasterol
CNE1, 人鼻咽細胞系人成巨核細胞白血病細胞
豆甾 質(zhì)量規(guī)格:>90%,GC Stigmasterol
人胎盤滋養(yǎng)層細胞培養(yǎng)基石刁柏(蘆筍)擬莖點霉 Phomopsis asparagi
豆甾 質(zhì)量規(guī)格:>90 %,GC Stigmasterol
異常漢遜酵母異常變種 Hansenula anomala var. anomala普雷恩毛霉 Mucor prainii
硝呋腙鹽鹽 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Nitrovin HCL,Difurazone
桿菌屬 Lactobacillus sp.膠韌革菌 Gloeostereum incarnatum
杜鵑素(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 Farrerol
根瘤菌Cell Counting Kit-8 (CCK-8試劑盒)
對香豆;對羥基肉桂(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 p-Coumaric acid
USMC(大鼠血管平滑肌細胞)大鼠食管平滑肌細胞培養(yǎng)基
對葉百部堿(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 Tuberstemonine
溶血磷脂酶Ⅰ(LYPLA1)重組蛋白小鼠100mL PIPES Buffer,0.5M, pH8.0 PIPES Buffer,0.5M, pH8.0 常溫保存
白E(IgE)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
1瓶 293A細胞株 293A 低溫運輸和保存
人丙型肝炎IgG(HCV-IgG)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
25uL Fluorescein -12- dUTP溶液 (1mM) Fluorescein -12- dUTP Solution -20℃避光保存
50T 口蹄疫病毒O亞型PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
人CD8分子(CD8)免疫試劑盒進口、組裝
人促胰液素/胰泌素(Secretin)免疫試劑盒
1mL 小牛胸腺DNA溶液(10mg/mL) Calf Thymus DNA Solution -20℃保存
100mL MOPS Buffer,0.5M,pH6.5 MOPS Buffer,0.5M,pH6.5 常溫保存
250mL Citrate Buffer(檸檬酸鹽緩沖液),0.5M,pH4.0 Citrate Buffer,0.5M,pH4.0 常溫保存