詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號 |
羰基還原酶1(CBR1)重組蛋白人 | Homo sapiens (Human,人) | GOY-01D2322 |
英文名稱:Recombinant Carbonyl Reductase 1 (CBR1)
CBR; SDR21C1; CRN; Short Chain Dehydrogenase/Reductase Family 21C,Member 1; 15-hydroxyprostaglandin dehydrogenase [NADP(+)]; Prostaglandin 9-ketoreductase
型號:GOY-01D2322
酶與激酶
代謝通路
營養(yǎng)代謝
物種:Homo sapiens (Human,人)
來源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細(xì)胞定位::細(xì)胞質(zhì)
預(yù)測分子量:37.6kDa
實際分子量:35kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:Ser2~Trp277 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 97%
等電點:8.6
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
顆粒酶A(GZMA)重組蛋白英文名稱:Recombinant Granzyme A (GZMA)CTLA3; HFSP; HF; H factor; Granzyme 1; Fragmentin-1; Hanukkah factor; Cytotoxic T-Lymphocyte-Associated Serine Esterase 3; CTL tryptase; Cytotoxic T-lymphocyte proteinase 1物種:Human,人
X-脯氨酰氨肽酶3(XPNPEP3)重組蛋白英文名稱:Recombinant X-Prolyl Aminopeptidase 3 (XPNPEP3)APP3; NPHPL1; Aminopeptidase P3物種:Human,人
腺苷酸環(huán)化酶2(ADCY2)重組蛋白英文名稱:Recombinant Adenylate Cyclase 2, Brain (ADCY2)HBAC2; ATP pyrophosphate-lyase 2; Adenylate cyclase type II物種:Human,人
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
費氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii串珠鐮孢 Fusarium moniliforme
大黃(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Rhein
Myc標(biāo)簽蛋白裂解液卵巢
大黃-8-O-β-D-葡萄糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Rhein-8-O-β-D-glucopyranoside
草菇 Volvariella bombycina異常漢遜酵母 Hansenula anomala
大麥芽堿(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品 Hordenine
沙門氏菌屬 Salmonella sp.mEPC, 小鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞-骨髓
大薊苷 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Pectolinarin
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
丹參素(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Danshensu
大鼠腎小管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基LLC-WRC 256(大鼠腹水細(xì)胞)
丹參素 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>95%,丹參提取 Danshensu
土曲霉 Aspergillus terreus瑞士桿菌 Lactobacillus helveticus
丹參素鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Sodium Danshensu
環(huán)狀芽胞桿菌 Bacillus circulans柄鏈格孢=柄格孢菌 Alternaria longipes
丹參I(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Tanshinone I
羰基還原酶1(CBR1)重組蛋白人100mL DIPSO Buffer,0.2M,pH8.0 DIPSO Buffer,0.2M,pH8.0 常溫保存
50T 玉米T25 PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
小鼠脂多糖/內(nèi)毒素(LPS)免疫試劑盒
人組蛋白H2b(histon-H2b)免疫試劑盒
醋酸酯紙片 20片/瓶
動力-硝酸鹽培養(yǎng)基(A法) Power - nitrate medium 250g
小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
2 ug pMBP- P pMBP- P 低溫運輸,-20℃保存
1瓶 IMR-32細(xì)胞株 IMR-32 低溫運輸和保存
100mL MOPSO Buffer,0.2M,pH7.5 MOPSO Buffer,0.2M,pH7.5 常溫保存
綿羊游離三碘甲狀腺原(Free-T3)免疫試劑盒