詳細(xì)介紹
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號 |
羰基還原酶1(CBR1)重組蛋白小鼠 | Mus musculus (Mouse,小鼠) | GOY-01D2288 |
英文名稱:Recombinant Carbonyl Reductase 1 (CBR1)
CBR; SDR21C1; CRN; Short Chain Dehydrogenase/Reductase Family 21C,Member 1; 15-hydroxyprostaglandin dehydrogenase [NADP(+)]; Prostaglandin 9-ketoreductase
型號:GOY-01D2288
酶與激酶
代謝通路
營養(yǎng)代謝
物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
來源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細(xì)胞定位::n/a
預(yù)測分子量:26.6kDa
實(shí)際分子量:-(差異分析請參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:Asn66~Asp271 with
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 90%
等電點(diǎn):-
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
Dicer酶1(DICER1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Dicer 1, Ribonuclease Type III (DICER1)Dicer; HERNA; Dicer 1,Double-Stranded RNA-Specific Endoribonuclease; Helicase with RNase motif; Helicase MOI物種:Human,人
基質(zhì)金屬9(MMP9)重組蛋白英文名稱:Recombinant Matrix Metalloproteinase 9 (MMP9)GELB; Gelatinase B; CLG4B; CLG4-B; 92 KDa Gelatinase; 92kDa Type IV Collagenase物種:Cattle,牛
腸激酶(ENTK)重組蛋白英文名稱:Recombinant Enterokinase (ENTK)PRSS7; TMPRSS15; Protease, Serine 7; Proenterokinase; Enteropeptidase; Transmembrane protease serine 15物種:Mouse,小鼠
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
玉蜀黍赤霉 Gibberella zeaePC-3M(人前列腺細(xì)胞)
比枯枯靈,右旋荷包牡丹堿(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 (+)-Bicuculline
人肺耐藥株粘質(zhì) Serratia marcescens
質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,BR (?)-Huperzine A
鼠桿菌 Lactobacillus murinus植物蛋白提取試劑(帶酶抑制劑)
表兒茶素沒食子酯 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,BR ECG
HL-02 [L-02,HL-7702], 正常人肝上皮細(xì)胞黑木耳 Auricularia auricula
表沒食子兒茶素 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,BR EGC
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum小鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基
萊苞迪甙A 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Rebaudioside A
MRC-5(人胚肺成纖維細(xì)胞 )葡萄牙假絲酵母 Candida lusitaniae
萊苞迪甙A(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Rebaudioside A
泡盛曲霉 Aspergillus awamori費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii
環(huán)亮氨甲酯鹽鹽 質(zhì)量規(guī)格:>98% Cycloleucine Methyl Ester.HCl
葡萄酒有孢漢遜酵母 Hanseniaspora uvarumMulti-tagged Protein Lysate/多標(biāo)簽蛋白裂解液
水溶性四唑-3 質(zhì)量規(guī)格:BR GLT003
羰基還原酶1(CBR1)重組蛋白小鼠T1N1瓊脂 T1N1 Agar 250g
大鼠母親DPP同源物4(Smad 4)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
雞腎素(Renin)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
魚補(bǔ)體蛋白3(C3)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
1瓶 CTLA4 Ig-24細(xì)胞株 CTLA4 Ig-24 低溫運(yùn)輸和保存
125mL Sodium Acetate Solution(乙酸鈉溶液),3M,pH5.2 Sodium Acetate Solution,3M,pH5.2 常溫保存
野生酵母培養(yǎng)基 250g
250mL PIPES Buffer,1.0M, pH7.0 PIPES Buffer,1.0M, pH7.0 常溫保存
豬肌酸激(CK)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
HE瓊脂平板(9cm) Hektoen Enteric Agar 10個/包
5000U Taq DNA聚合 Taq DNA Polymerase -20℃保存