詳細介紹
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質粒轉染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產(chǎn)品質量。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
交付內容:純化好的目標蛋白及純化報告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag)或切除純化標簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達90%以上。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號 |
抗酶抑制因子1(AZIN1)重組蛋白人 | Homo sapiens (Human,人) | GOY-01D2275 |
英文名稱:Recombinant Antizyme Inhibitor 1 (AZIN1)
OAZI; OAZIN; ODC1L; Ornithine Decarboxylase Antizyme Inhibitor; Ornithine Decarboxylase 1-Like
型號:GOY-01D2275
信號轉導
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,人)
來源:原核表達
宿主E.coli
內毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位::n/a
預測分子量:34.8kDa
實際分子量:-(差異分析請參閱說明書)
片段與標簽:Ile5~Lys290 with
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 95%
等電點:-
應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
以下是相關產(chǎn)品:
AMP激活蛋白激酶β1(PRKAb1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Protein Kinase, AMP Activated Beta 1 (PRKAb1)AMPK; HAMPKb; 5'-AMP-Activated Protein Kinase Subunit Beta-1 Non-Catalytic Subunit; Adenosine Monophosphate Activated Protein Kinase(AMPK)物種:Human,人
彈性3B(ELA3B)重組蛋白英文名稱:Recombinant Elastase 3B (ELA3B)CELA3B; Chymotrypsin Like Elastase Family Member 3B; Protease E; Fecal Elastase; Elastase 1; Cholesterol-Binding Pancreatic Protease; Pancreatic Endopeptidase E物種:Mouse,小鼠
腸細胞激酶(ICK)重組蛋白英文名稱:Recombinant Intestinal Cell Kinase (ICK)LCK2; MRK; Serine/threonine-protein kinase ICK; Laryngeal cancer kinase 2; MAK-related kinase物種:Rat,大鼠
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管,離心10000轉/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉移至新的預冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細胞洗滌后,轉至新的預冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarumM14(人黑色素瘤細胞)
化鎂 質量規(guī)格:工業(yè)級 Magnesium chloride
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus
苜蓿素(標準品) 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 Tricin
II型膠原酶(含10mL酶解緩沖液)小鼠垂體瘤細胞
兒茶素沒食子酯 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 CG
膠凍樣芽胞桿菌 Bacillus mucilaginosus佛羅里達側耳 Pleurotus florida
人參皂苷Rg5 質量規(guī)格:HPLC≥95%,對照品 GinsenosideRg5
橢圓釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae var.ellipsoideus人神經(jīng)少突起前質膠質細胞培養(yǎng)基
化鎂銨,化銨鎂,六水合化鎂銨 質量規(guī)格:CP AMMoniuM MagnesiuM chloride
芽胞菌 Bacillus sp.熒光假單胞菌 Pseudomonas fluorescens
訶子林鞣 質量規(guī)格:HPLC≥96%,標準品 Chebulinic acid
BT-549(人腺管細胞)厚垣孢普可尼亞菌 Pochonia chlamydosporia
訶子鞣質,訶子鞣 質量規(guī)格:HPLC≥96%,標準品 Chebulagic acid
地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformisHKC(人胚腎上皮細胞)
劍麻皂苷元(標準品) 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 Tigogenin
抗酶抑制因子1(AZIN1)重組蛋白人猴子N端前腦鈉素(NT-proBNP)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應
大鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)免疫試劑盒進口、組裝
人Egl九同源物1(EGLN1/C1orf12/PNAS-118/PNAS-137)免疫試劑盒進口、組裝
100次 總抗氧化能力檢測試劑盒(ABTS快速法) Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
1g 過氧化氫 (牛肝) Catalase From Bovine Liver -20℃保存
綿羊口蹄疫(FMDV)抗體(IgM)免疫試劑盒進口、分裝
人化糖原合成激3(pGSK-3)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應
猴子性激素結合球蛋白(SHBG)免疫試劑盒
改良醇麥康凱瓊脂添加劑 Modified Sorbitol MacConkey Agar Additives 1ml*5支
50T 豬水泡性口炎病毒PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
人Trem樣轉錄因子1(TREML1)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應