詳細介紹
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號 |
DNA指導聚合酶α1(POLa1)重組蛋白人 | Homo sapiens (Human,人) | GOY-01D2254 |
英文名稱:Recombinant Polymerase DNA Directed Alpha 1 (POLa1)
POLA; p180; DNA polymerase alpha catalytic subunit p180
型號:GOY-01D2254
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,人)
來源:原核表達
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位::細胞核, 細胞質(zhì)
預測分子量:29.5kDa
實際分子量:32kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標簽:Gly1240~Ser1462 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 95%
等電點:7.6
應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標簽(Tag)或切除純化標簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
小亞基鈣1(CAPNS1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Calpain, Small Subunit 1 (CAPNS1)CANP; 30K; Calpain 4; CANPS; CAPN4; CDPS; Calcium-activated neutral proteinase small subunit; Calcium-dependent protease small subunit; Calpain regulatory subunit物種:Human,人
DNA指導聚合酶δ1(POLd)重組蛋白英文名稱:Recombinant Polymerase DNA Directed Delta 1 (POLd)CDC2; POLD1; DNA polymerase subunit delta p125物種:Mouse,小鼠
果糖二磷酸醛縮酶A(ALDOA)重組蛋白英文名稱:Recombinant Aldolase A, Fructose Bisphosphate (ALDOA)FBA; ALDO-A; Fructose 1,6 Bisphosphate Aldolase; Lung cancer antigen NY-LU-1; Muscle-type aldolase物種:Rat,大鼠
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis小鼠白血病克隆細胞系
琥珀普卡必利 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Prucalopride Succinate
黃色孢鏈霉菌 Streptomyces longisporoflavus腫瘤細胞
鹽納洛 質(zhì)量規(guī)格:>98%,二水合物,阿片類受體拮抗劑 Naloxone HCl dihydrate
鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
NVP-BKM120 質(zhì)量規(guī)格:>98%,選擇性的PI3K抑制劑 BKM120;NVPBKM120; Buparlisib)
人呼吸道上皮細胞培養(yǎng)基解脂亞羅酵母 Yarrowia lipolytica
硝布康唑 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Butoconazole nitrate
中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuiiMDA-MB-231(人腺細胞)
NHS-biotin;琥珀酰亞酯 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR NHS-biotin
USMC(大鼠血管平滑肌細胞)泡盛曲霉 Aspergillus awamori
(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 Rebeprazole sodium
小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌 Yersinia enterocolitica布魯塞爾德克酵母 Dekkera bruxellensis
質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR Rebeprazole sodium
串珠鐮孢 Fusarium moniliformehDPSCs, 人前磨牙牙髓干細胞
克肟 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Cefixime
DNA指導聚合酶α1(POLa1)重組蛋白人羊溶菌(LZM)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應
50T 呼吸道合胞病毒A組PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
人CD10分子(CD10)免疫試劑盒
AK瓊脂(2號) AK Agar(No.2) 250g
大鼠11β羥類固醇脫氫1型(11β-HSD1)免疫試劑盒進口、分裝
變形桿菌成套生化鑒定管(BXWS) BXWS 13種*1套/盒*10盒
1套 可逆性銅染試劑盒
猴子巨噬細胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)免疫試劑盒
1瓶 SGC-7901/DDP細胞株 SGC-7901/DDP 低溫運輸和保存
兔血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應
100mg 秋水仙素 Colchicine 室溫避光保存