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ATP依賴性DNA連接酶Ⅰ(LIG1)重組蛋白人

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更新時間:2023-03-15 16:57:36瀏覽次數(shù):332

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號 GOY-01D2058 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant ATP Dependent DNA ligase I (LIG1)
物種 Homo sapiens (Human,人)    
ATP依賴性DNA連接酶Ⅰ(LIG1)重組蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品:凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體 英文名稱:CARD8 0.1ml凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體 英文名稱:CARD7 0.1ml半胱胺酸4/11抗體 英文名稱:Caspase 4+Caspase 11 0.1ml

詳細(xì)介紹

以下是相關(guān)產(chǎn)品:

丙酮酸脫氫酶α2(PDHa2)重組蛋白英文名稱:Recombinant Pyruvate Dehydrogenase Alpha 2 (PDHa2)PDHAL; Lipoamide; Pyruvate dehydrogenase E1 component subunit alpha, testis-specific form, mitochondrial物種:Human,人

誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(NOS2)重組蛋白英文名稱:Recombinant Nitric Oxide Synthase 2, Inducible (NOS2)NOS2A; INOS; HEP-NOS; I-NOS; Hepatocytes Oxide Synthase; Peptidyl-cysteine S-nitrosylase NOS2物種:Rat,大鼠

羥酸氧化酶1(HAO1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Hydroxyacid Oxidase 1 (HAO1)GOX; Glycolate Oxidase物種:Mouse,小鼠

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號

ATP依賴性DNA連接酶Ⅰ(LIG1)重組蛋白人

Homo sapiens (Human,人)

GOY-01D2058

 

 

英文名稱:Recombinant ATP Dependent DNA ligase I (LIG1)

Polydeoxyribonucleotide synthase [ATP] 1

型號:GOY-01D2058

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,人)

來源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位::細(xì)胞核

預(yù)測分子量:24.3kDa

實(shí)際分子量:24kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Gly484~Ile663 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液(pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 95%

等電點(diǎn):7.8

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個

0.5 mL~1 mL

5×106個

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

CHO(倉鼠卵巢細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

多潘立 質(zhì)量規(guī)格:>99%,EP5.0 Domperidone

 VCaP(人前列腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

多潘立(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 Domperidone

 小鼠腺高轉(zhuǎn)移細(xì)胞英文名稱:MA-891

硝柳(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Niclosamide

 P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] (小鼠骨髓瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

硝柳 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR Niclosamide

 小鼠胰島素瘤細(xì)胞英文名稱:MIN6

環(huán) 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP32,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) Ciprofloxacin

 胰蛋白胨/胰化蛋白胨/TryptoneBR250/500克國產(chǎn)/進(jìn)口

環(huán)(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Ciprofloxacin

 牛粉/小牛浸膏粉/小牛浸膏粉/牛膏粉/牛浸粉/牛提取物/牛抽提物/Beef extract powderBR250克國產(chǎn)/進(jìn)口

 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR Famciclovir

 副溶血性弧菌增菌液副溶血性弧菌的增菌培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口

(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品 Famciclovir

ATP依賴性DNA連接酶Ⅰ(LIG1)重組蛋白人豬心鈉肽(ANP)免疫試劑盒

100µL 小鼠抗Flag標(biāo)簽單抗 Anti Flag-Tag Mouse MAb -20℃保存

人白介素8(IL-8/CXCL8)自身抗體免疫試劑盒

B用培養(yǎng)基  250g

人血小板生成素受體(C-MPL)自身抗體IgG 免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

PH7.6鹽緩沖液  250ml*20瓶

250mg 四氮唑藍(lán)  NBT 4℃避光保存

1個 0.5mLDNA超濾離心管(300-500KD)  

鼠李糖發(fā)酵管  20支

犬轉(zhuǎn)移生長因子β1(TGF-β1)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

人柯薩奇病毒IgE(Cox V-IgE)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

 


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