詳細介紹
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號 |
胎盤堿性磷酸酶(ALPP)重組蛋白大鼠 | Rattus norvegicus (Rat,大鼠) | GOY-01D2133 |
英文名稱:Recombinant Alkaline Phosphatase, Placental (ALPP)
PLAP1; ALP; ALPG; ALPPL; GCAP; Alkaline phosphatase Regan isozyme; Placental alkaline phosphatase 1
型號:GOY-01D2133
酶與激酶
代謝通路
物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
來源:原核表達
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位::分泌
預(yù)測分子量:30.6kDa
實際分子量:33kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標簽:Thr68~Ala313 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液(pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 97%
等電點:8.4
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標蛋白及純化報告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag)或切除純化標簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
前列腺素D合酶(PTGDS)重組蛋白英文名稱:Recombinant Prostaglandin D2 Synthase (PTGDS)HPGDS; GSTS; H-PGDS; PDS; PGD2; PGDS; PGDS2; Glutathione S-Transferase Sigma; Glutathione-requiring prostaglandin D synthase; Prostaglandin D2 Synthase, Hemaoietic物種:Mouse,小鼠
氨基羧基粘康酸半醛脫羧酶(ACMSD)重組蛋白英文名稱:Recombinant Aminocarboxymuconate Semialdehyde Decarboxylase (ACMSD)Picolinate carboxylase; 2-amino-3-carboxymuconate-6-semialdehyde decarboxylase物種:Mouse,小鼠
基質(zhì)金屬23B(MMP23B)重組蛋白英文名稱:Recombinant Matrix Metalloproteinase 23B (MMP23B)MMP22; MMP23-B; MIFR; MIFR-1; Matrix Metalloproteinase 22; Femalysin; Matrix Metalloproteinase In The Female Reproductive Tract物種:Mouse,小鼠
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae刺孢吸水鏈霉菌 Streptomyces hygrospinosus
性紅183 質(zhì)量規(guī)格:AR, Acid Red 183
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(未分化)
性紅9 質(zhì)量規(guī)格:AR,進分 Acid Red 9
植物桿菌 Lactobacillus plantarum釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
燦爛綠,亮綠 質(zhì)量規(guī)格:BS Brilliant green
NCI-H1975(人肺腺細胞)葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum
孔雀石綠 質(zhì)量規(guī)格:BS Malachite green
黑色鏈霉菌 Streptomyces niger大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
甲基綠 質(zhì)量規(guī)格:BS Methyl Green
大鼠骨髓基質(zhì)細胞培養(yǎng)基DH82(犬巨噬細胞)
茜素綠;性綠25 質(zhì)量規(guī)格:BS Alizarin green
鞘氨桿菌屬 Sphingobacterium sp.中間假絲酵母 Candida intermedia
萘酚綠B 質(zhì)量規(guī)格:BS Naphthol Green B
黑曲霉 Aspergillus niger大麗輪枝菌 Verticillium dahliea Kleb
固綠FCF 質(zhì)量規(guī)格:BS Fast Green FCF
胎盤堿性磷酸酶(ALPP)重組蛋白大鼠人妊娠特異性β1糖蛋白4(PSG4)免疫試劑盒
2 ug pLVX-aMHC GFP pLVX-aMHC GFP 低溫運輸,-20℃保存
1000U p19 siRNA 結(jié)合蛋白 p19 siRNA Binding Protein -20℃保存
山羊促生長激素釋放激素(GHRH)免疫試劑盒進口、組裝
小鼠熱休克因子1(HSF1)免疫試劑盒
高鹽察氏瓊脂 Salt Czapek Dox Agar 250g
50只 專用離心管 (配研磨杵用) 常溫
人柯薩奇病毒(Cox V)抗體(IgG)免疫試劑盒進口、組裝
1次 96孔板血液DNAout(真空法) 96 Microwell Plate Blood DNAOUT 常溫
人角化細胞生長因子(KGF)免疫試劑盒進口、組裝
12x50nm Cyanine 5-NHS Ester Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存