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產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 測(cè)試方法 | 貨號(hào) |
硫氧還蛋白氧化還原酶(TrxR)微量法測(cè)試盒 | 100管/96樣 | 微量法 | GOY-01S6370 |
商品介紹:
TrxR是一種NADPH依賴的包含FAD結(jié)構(gòu)域的二聚體硒酶,屬于吡啶核苷酸-二硫化物氧化還原酶家族成員,與硫氧還蛋白以及NADPH共同構(gòu)成了硫氧還蛋白系統(tǒng)。TrxR與GR活性類似,催化GSSG還原生成GSH,是谷胱甘肽氧化還原循環(huán)關(guān)鍵酶之一。
測(cè)定原理:
TrxR催化NADPH還原DTNB生成TNB和NADP+,TNB在412 nm有特征吸收峰,通過(guò)測(cè)定412nm波長(zhǎng)處TNB的增加速率,即可計(jì)算TrxR活性。
自備儀器和用品:
低溫離心機(jī)、可調(diào)節(jié)移液器、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、和蒸餾水。
測(cè)定操作表:
劑組成和配制:
提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體20mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。
試劑三:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。
試劑四:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。
酶活性計(jì)算公式:
a. 用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每毫克組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量為一個(gè)酶活力單位(U)。
DAO活性(nmol/min/mg prot)= ×V反總÷(V樣×Cpr)÷T= 18×A460÷Cpr
(2)按樣本質(zhì)量計(jì)算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每克組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個(gè)酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/g 鮮重)= ×V反總÷(V樣÷V樣總×W)÷T= 18×A460÷W
(3)按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每104個(gè)細(xì)胞每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個(gè)酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/104cell)= ×V反總÷(V樣÷V樣總×細(xì)胞數(shù)量)÷T= 18×A460÷細(xì)胞數(shù)量
(4) 按液體體積計(jì)算
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每毫升血清每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個(gè)酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/mL)= ×V反總÷V樣÷T= 18×A460
ε:氧化型鄰聯(lián)茴香胺毫摩爾消光系數(shù):7.5 L/mmol/cm;d:比色皿光徑,1cm;V反總:反應(yīng)總體積,0.2mL;V樣:反應(yīng)中樣本體積,0.05mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;T:反應(yīng)時(shí)間,30min
b. 用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每毫克組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量為一個(gè)酶活力單位(U)。
DAO活性(nmol/min/mg prot)= ×V反總÷(V樣×Cpr)÷T= 36×A460÷Cpr
(2)按樣本質(zhì)量計(jì)算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每克組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個(gè)酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/g 鮮重)= ×V反總÷(V樣÷V樣總×W)÷T= 36×A460÷W
(3)按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每104個(gè)細(xì)胞每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個(gè)酶活力單位。
MQAE( 氯離子熒光探針 )20mg Di-2-ANEPEQ 5mg
NAO 25mg DH5α 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10
NBD-Cl25mg DH10B 感受態(tài)細(xì)胞0.1 mL×10
Nile Red25mg dGTP 溶液,2.5mM2mL
Quin-2AM1mg dGTP 溶液,100mM0.5mL
dATP 溶液,100mM0.5mL 高 GC 革氏陽(yáng)性細(xì)菌 PCR Mix 5100 次
dTTP 溶液,2.5mM2mL 高 GC DNA 清除劑,PCR 級(jí)1.5mL
dTTP 溶液,100mM0.5mL 溶液 ,100mg/mL1mL
dGTP 溶液,2.5mM2mL 肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL
dGTP 溶液,100mM0.5mL 鈣蛋白酶抑制劑Ⅱ溶液,10mg/mL10mL
大鼠γ分泌酶elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠γ干擾素(IFN-γ)elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠γ干擾素(IFNγ)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠γ干擾素(IFN-γ)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠γ-干擾素(IFNγ)elisa檢測(cè)試劑盒
硫氧還蛋白氧化還原酶(TrxR)微量法測(cè)試盒脂蛋白 PAGE 染液1套 Glucosamine( 胰島素抵抗誘導(dǎo)劑 )5g
糖蛋白 PAGE 染液1套 Genistein( 蛋白激酶抑制劑 )25mg
質(zhì)譜兼容型蛋白銀染試劑盒10 次 G(5′)ppp(5′)G 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD
銀染清除劑30 次 G(5′)ppp(5′)A 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD
成骨細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL Fura-2,五銨鹽1mg