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詳細介紹
產(chǎn)品詳細介紹：
本品是專用于染料法(SYBR GreenⅠ)實時熒光定量PCR的預混體系，濃度為2×,包含Fast Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、dNTPs、SYBR Green I熒光染料和Mg2+，操作簡單方便。主要用于基因組DNA靶序列和RNA反轉錄后的cDNA靶序列檢測。本品所含熒光染料SYBR Green I可以與所有的雙鏈DNA相結合，使該產(chǎn)品可用于不同靶序列的檢測而不需合成特異性標記探針。本品含有的Fast Taq DNA Polymerase能有效減少在常溫條件下由引物和模板非特異性結合或引物二聚體而產(chǎn)生的非特異性擴增，酶的激活僅需在95℃孵育20s。整個PCR反應過程比普通反應可節(jié)省約40分鐘，大大縮短了PCR的反應時間。*的PCR緩沖體系與熱啟動酶的組合，有效抑制了非特異產(chǎn)物的產(chǎn)生，并顯著提高PCR的擴增效率。該產(chǎn)品應用范圍廣，適用于普通和快速定量PCR程序，可適用于無需ROX校正的所有熒光定量PCR儀。 ??ROX染料用于校正定量PCR儀孔與孔之間產(chǎn)生的熒光信號誤差，一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 擴增儀。不同儀器的激發(fā)光學系統(tǒng)有所不同，因此ROX染料的濃度必須與相應的熒光定量PCR儀相匹配。 注意事項： 1、使用前請上下顛倒輕輕混勻，盡量避免起泡，并經(jīng)短暫離心后使用。 2、本產(chǎn)品中含有熒光染料SYBR Green I，保存本產(chǎn)品或配制PCR反應液時應避免強光照射。 3、避免反復凍融本品，反復凍融可能使產(chǎn)品性能下降。本產(chǎn)品長期保存可置于-20℃，避光。如果在短期內(nèi)需要頻繁使用，可在2～8℃保存。 4、本品不能用于探針法熒光定量PCR。 儲存條件：-20℃，避免反復凍融 |
下列是產(chǎn)品的訂購信息!產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 貨號 |
BaFaSYBR Mixture | 5ml | GOY-F10298 |
DNA提取流程圖：
實驗步驟
(1)實驗開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可！固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質量
(在抽提過程中,若蛋白質含量或其它的雜質還較多,可以增加抽提次數(shù))
腦膜炎奈瑟菌通用型(NM-U)核酸檢測試劑盒 48T 3β-Acetoxy-5α-androstan-17β-ol 中文名：3-乙?；?/span>-5α-雄烷二 分子式：C21H34O3
納米二氧化鈦 Ribavirin 36791-04-5 中文名：利巴韋林 分子式：C8H12N4O5
莫氏立克次體(RM)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T 3-Amino-3-phenylpropionic acid 中文名：C9H11NO2 分子式：C9H11NO2
膜聯(lián)蛋白5 英文名稱： Annexin 5 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： ANXA-5 3β-Hydroxyporiferast-5-en-7-one 中文名： 分子式：C29H48O2
膜聯(lián)蛋白2 英文名稱： Annexin 2 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： ANXA-2 Otophylloside B 中文名：青陽參苷B 分子式：C49H78O16
虎杖甙/虎杖苷/白藜蘆苷(標準品) Polydatin 質量規(guī)格：HPLC≥98%,標準品 RatThromboxaneB2,TXB2ELISAKit大鼠血栓素B2(TXB2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
十八烷,1-十八(標準品) 1-Octadecanol 質量規(guī)格：>98%,標準品 LOWRY蛋白質濃度定量試劑盒100
十八烷,1-十八 1-Octadecanol 質量規(guī)格：>98% Porcineacetylcholine,ACHELISA試劑盒豬乙酰(ACh)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Ruxolitinib (INCB018424) Ruxolitinib (INCB018424) 質量規(guī)格：>99% 小鼠基己糖苷酶Bβ(HEXβ)ELISA試劑盒 ，英文名： HEXβ ELISA Kit
MK-1775,MK1775 MK-1775 質量規(guī)格：>98%,Wee1激酶抑制劑 人胸腺肽(Thymosin)ELISA檢測試劑盒HumahymosinELISAKit 96T/48T
PD184352 (CI-1040) PD-184352 (CI-1040) 質量規(guī)格：>99%,MEK1/2抑制劑 大鼠角化細胞因子(KAF)/雙調蛋白(AR)試劑盒 Rat keratinocyte aocrine factor/Amphiregulin,KAF/AR ELISA Kit
2-脫氧-D-葡萄糖 2-Deoxy-D-glucose 質量規(guī)格：>98%,BR 英文名稱RatSubstancePELISAKit大鼠P物質(SP)規(guī)格：96T/48T
坎地沙坦 Candesartan 質量規(guī)格：>99%,BR,可用于細胞培養(yǎng) 咖啡乙酰舒泛(acesulfameK)含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒20
Ruxolitinib(INCB018424) phosphate INCB018424) phosphate 質量規(guī)格：>98%,JAK1/2抑制劑 ELISAKitDyn人強啡肽規(guī)格：48T/96T
SB1317,TG02 SB-1317,TG-02 質量規(guī)格：>97%,CDKs/JAK2 / FLT3抑制劑 小鼠基己糖苷酶Aα(HEXα)ELISA試劑盒 ，英文名： HEXα ELISA Kit
快速實時熒光定量PCR預混體系細胞半胱-3（CASPASE-3）活性比色法定量檢測試劑盒
組織半胱-2（CASPASE-2）活性熒光定量檢測試劑盒
細胞半胱-2（CASPASE-2）活性熒光定量檢測試劑盒
組織半胱-2（CASPASE-2）活性比色法定量檢測試劑盒
細胞半胱-2（CASPASE-2）活性比色法定量檢測試劑盒
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細胞，每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml，用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應根據(jù)培養(yǎng)板面積而定，不取決于細胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導致提取的RNA有DNA污染。
c．細胞懸液 離心收集細胞，每5-10×106動物、植物、酵母細胞或1×107細菌細胞加入1ml TRIzol，反復吸打。加TRIzol之前不要洗滌細胞以免mRNA降解。一些酵母和細菌細胞需用勻漿儀處理。
2．將勻漿樣品在室溫（15-30℃）放置5分鐘，使核酸蛋白復合物*分離。
3．可選步驟：如樣品中含有較多蛋白質，脂肪，多糖或胞外物質（肌肉，植物結節(jié)部分等）可于2-8℃10000×g離心10分鐘，取上清。離心得到的沉淀中包括細胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。處理脂肪組織時，上層有大量油脂應去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，劇烈振蕩15秒，室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層：底層為黃色有機相，上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中，水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉移到新管中，如要分離DNA和蛋白質可保留有機相，進一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙，室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘，離心前看不出RNA沉淀，離心后在管側和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。
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