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上海谷研實業(yè)有限公司>>分子生物學(xué)試劑>>核酸擴(kuò)增>>50次SP6體外轉(zhuǎn)錄試劑盒

SP6體外轉(zhuǎn)錄試劑盒

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具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 型號 50次
  • 品牌 R&D/美國
  • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
  • 所在地 上海市

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更新時間:2022-04-22 14:31:08瀏覽次數(shù):208

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 貨號 GOY-F10294
應(yīng)用領(lǐng)域 化工 主要用途 僅供科研使用
SP6體外轉(zhuǎn)錄試劑盒公司正*的各種產(chǎn)品細(xì)胞CaM KII激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
組織CaM KII激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
細(xì)胞CaM KIV激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
組織CaM KIV激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
細(xì)胞CASEIN KINASE 1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)

詳細(xì)介紹

DNA提取流程圖:

QQ截圖20220414142532.png

下列是產(chǎn)品的訂購信息!產(chǎn)品僅用于科研

中文名稱

英文名稱

產(chǎn)品規(guī)格

貨號

SP6體外轉(zhuǎn)錄試劑盒

SP6 in vitro   Transcription Kit

50

GOY-F10294

產(chǎn)品詳細(xì)介紹:

本試劑盒是基于SP6 RNA聚合酶的RNA體外轉(zhuǎn)錄試劑盒,它利用含有SP6啟動子的模版DNA,以NTP為底物,從SP6啟動子下游開始合成與模版DNA中一條鏈互補(bǔ)的RNA,簡單快速獲得大量的RNA分子。

產(chǎn)品特點:

即開即用,用戶只需提供含SP6啟動子的DNA模板即可以進(jìn)行體外轉(zhuǎn)錄實驗,不需要單獨準(zhǔn)備每一個成份。

單溶液預(yù)配液,減少加樣次數(shù),避免了操作誤差,增加了可重復(fù)性。

模版DNA可以是線性化的質(zhì)粒DNA,也可以是PCR擴(kuò)增產(chǎn)物。

可以合成的RNA的佳長度在20nt2000nt之間。

產(chǎn)品配方經(jīng)過精心優(yōu)化,每μg DNA模版可以合成26μg RNA。

得到的RNA可以用于RNA結(jié)構(gòu)研究、核酶生物化學(xué)、體外翻譯、RNA-蛋白質(zhì)相互作用、反義技術(shù)、SELEX技術(shù)和RNA干擾(RNAi)等實驗。

保存:-20℃,有效期一年。

 

操作步驟:
1.
勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅。
b.
單層培養(yǎng)細(xì)胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞,每10cm2面積(3.5cm直徑的培養(yǎng)板)1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,不取決于細(xì)胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNADNA污染。
c
.細(xì)胞懸液 離心收集細(xì)胞,每5-10×106動物、植物、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol,反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理。
2
.將勻漿樣品在室溫(15-30)放置5分鐘,使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
3
.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質(zhì),脂肪,多糖或胞外物質(zhì)(肌肉,植物結(jié)節(jié)部分等)可于2-810000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時,上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進(jìn)行下一步操作。
5.
每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8
10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機(jī)相,上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7.
把水相轉(zhuǎn)移到新管中,如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機(jī)相,進(jìn)一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙,室溫放置10分鐘。
8. 2-8
10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。
檸檬酸(CA)含量測試盒   可見分光光度法   50/48              Rizatriptan benzoate  145202-66-0  中文名:苯甲酸利扎曲坦  分子式:C22H25N5O2 

鎳快速測試盒   Nickel rapid test case  Ranitidine  66357-35-5  中文名:  分子式:C13H22N4O3S  度:98.0%  關(guān)鍵詞: 

鎳測試盒   Nickel test case  4-[2-(2-Amino-4,7-dihydro-4-oxo-1H-pymol[2,3-d]pyrimodin-5-yl)ethyl]benzoic acid methyl ester  中文名:  分子式:C16H16N4O3  度:98.0%

尿酸含量測試盒   可見分光光度法   50/48              Tropisetron   105826-92-4  中文名:鹽酸托烷司瓊  分子式:C17H21ClN2O2 

尿激酶型纖溶酶原激活因子受體 (uPA-R)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝     O-Benzyl-L-tyrosine  16652-64-5  中文名:O-芐基-L-  分子式:C16H17NO3
戴斯-馬丁氧化劑   Dess-Martin periodinane  質(zhì)量規(guī)格:>95% HumanVascularEndothelialcellGrowthFactorD,VEGF-DELISAKit人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子D(VEGF-D)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

西多福韋  Cidofovir  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶12(MMP12)ELISA試劑盒 ,英文名: MMP12 ELISA Kit

4-氨基-5-咪唑甲酰胺  5-Amino-4-imidazolecarboxamide  質(zhì)量規(guī)格:>98%(滴定) 人脂0壁酸(LTA)ELISA檢測試劑盒Humanlipoteichoicacids,LTAELISAKit 96T/48T

TNP 470/O-(氯乙酰氨甲?;?/span>)煙曲   AGM-1470   質(zhì)量規(guī)格:≥97% 大鼠細(xì)胞因子信號轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子3(SOCS-3)試劑盒 Rat suppressors of cytokine signaling 3,SOCS-3 ELISA Kit

牛磺石膽酸鈉(進(jìn)分)   taurolithocholate  質(zhì)量規(guī)格:≥97%進(jìn)口分裝 英文名稱RatAndrostenedioneELISAKit大鼠雄烯二同(ASD)規(guī)格:96T/48T

甘氨鵝脫氧膽酸  glycochenodeoxycholic acid (GCDCA  質(zhì)量規(guī)格:>97% 果菜纖維素酶解法定量檢測試劑盒10

?;秦i去氧膽酸鈉   taurohyodeoxycholate hydrate  質(zhì)量規(guī)格:≥98%,美國進(jìn)口 ELISAKitPDGF-AB人血血小板衍生生長因子AB規(guī)格:48T/96T

磺丁基-β-環(huán)糊精;磺丁基醚倍他環(huán)糊精鈉  Captisol( beta-Cyclodextrin, sulfobutyl ethers,  salts)  質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP10)ELISA試劑盒 ,英文名: MMP10 ELISA Kit

纈氨  Valinomycin  質(zhì)量規(guī)格:>95% (HPLC),進(jìn)分 人游離原卟啉(FEP)ELISA檢測試劑盒HumanFreeerythrocyteproloporphyrin,FEPELISAKit 96T/48T

5--1,3-二甲基吡唑   5-Chloro-1,3-dimethyl-1H-pyrazole  質(zhì)量規(guī)格:>98%, 大鼠細(xì)胞因子信號轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子1(SOCS-1)試劑盒 Rat suppressors of cytokine signaling 1,SOCS-1 ELISA Kit
SP6
體外轉(zhuǎn)錄試劑盒細(xì)胞半胱-8CASPASE-8)活性比色法定量檢測試劑盒

組織半胱-7CASPASE-7)活性熒光定量檢測試劑盒

細(xì)胞半胱-7CASPASE-7)活性熒光定量檢測試劑盒

組織半胱-7CASPASE-7)活性比色法定量檢測試劑盒

細(xì)胞半胱-7CASPASE-7)活性比色法定量檢測試劑盒

實驗步驟
(1)
實驗開始前將RNA提取液于65水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL80ul,50mL中加入300ul)
(2)
取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65
水浴3-10 min,期間混勻2-3
(4)
加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
(5)
取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
(6)
加入1/4V體積10M LiCl溶液,4放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4
離心20min
(8)
棄上清,500ul SSTE溶解沉淀
(9)
::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1(10,000rpm,4,5min)
(10)
2V體積的無水乙,-70冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4
離心20 min
(12)
棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)
200ulDEPC處理水溶解
(14)
用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質(zhì)量
(
在抽提過程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))


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