詳細(xì)介紹
下列是產(chǎn)品的訂購(gòu)信息!產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 貨號(hào) |
DNA Marker(500bp~4kb) | 50次(300μ)|200次(4×300μl) | GOY-F10123 |
產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
本制品是由單獨(dú)制備的PCR產(chǎn)物混合而成,共有8條DNA片段,已加入上樣緩沖液,可直接電泳,每次上樣6μl,為便于電泳后觀察,2000 bp條帶亮,每次用量約為100ng,其它條帶的DNA每次用量約為50 ng。本制品濃度約為80μg DNA/ml。 條帶圖:6μl加樣,凝膠長(zhǎng)度10cm,電壓8V/cm,0.5×TBE Buffer 貯存液組成:10mM Tris-HCl(pH8.4),10mM EDTA,0.02%溴酚蘭,5%甘油 儲(chǔ)存條件:-20℃可保存一年以上,4℃保存三個(gè)月。 使用方法: 1.取3-6μl本產(chǎn)品加入瓊脂糖凝膠的加樣孔中(每1mm點(diǎn)樣孔寬度加1 μl,如果加樣孔較寬,可適當(dāng)增加上樣量),進(jìn)行電泳。 2.建議電泳條件為0.7-1.5%瓊脂糖凝膠,正負(fù)極之間電壓4-10V/cm。 3.通過(guò)EB染色,在紫外燈下觀察電泳條帶。 注意事項(xiàng): 1.本產(chǎn)品可直接使用,不要加熱。 2.及時(shí)更換電泳緩沖液并使用新制的凝膠,以免影響電泳結(jié)果。 |
DNA提取流程圖:
實(shí)驗(yàn)步驟
(1)實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養(yǎng)就更好說(shuō)了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過(guò)夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無(wú)水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)掃描檢測(cè)RNA的質(zhì)量
(在抽提過(guò)程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過(guò)TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細(xì)胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞,每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,不取決于細(xì)胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNA有DNA污染。
c.細(xì)胞懸液 離心收集細(xì)胞,每5-10×106動(dòng)物、植物、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol,反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理。
2.將勻漿樣品在室溫(15-30℃)放置5分鐘,使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
3.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質(zhì),脂肪,多糖或胞外物質(zhì)(肌肉,植物結(jié)節(jié)部分等)可于2-8℃10000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時(shí),上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進(jìn)行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機(jī)相,上層為無(wú)色水相和一個(gè)中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中,如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機(jī)相,進(jìn)一步操作見(jiàn)后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙,室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。
兔子促上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISAKit Thevetin B 27127-79-3 中文名: 分子式:C42H66O18
兔子促甲狀elisa試劑盒 兔子促甲狀試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子促甲狀試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子促甲狀試劑盒、兔子促甲狀elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 6β-Hydroxystigmast-4-en-3-one 36450-02-9 中文名:6β-羥基豆甾-4-烯-3-酮 分子式:C29H48O2 度:95.0% 關(guān)鍵詞: 菜豆; 櫟木; 接骨木屬; 豆甾烷; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
兔子促甲狀elisa試劑盒 兔子促甲狀試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子促甲狀試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子促甲狀試劑盒、兔子促甲狀elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 6-O-Methylcerevisterol 126060-09-1 中文名: 分子式:C29H48O3 度:97.0% 關(guān)鍵詞: 靈芝; 麥角甾烷; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
兔子促甲狀(TSH)ELISA試劑盒 6-O-Feruloylglucose 137887-25-3 中文名:6-O-阿魏酰葡萄糖 分子式:C16H20O9 度:97.5% 關(guān)鍵詞: 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
兔子促甲狀(TSH)ELISAKit 6-O-(p-Hydroxybenzoyl)glucose 202337-44-8 中文名:6-O-對(duì)羥基苯甲酰葡萄糖 分子式:C13H16O8 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
十一酸甲酯(Standard for GCS,≥99.0%(GC)) Methyl undecanoate 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GCS,≥99.0%(GC) RatMyoglobin,MYO/MBELISAKit大鼠肌紅蛋白(MYO/MB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
正壬烷(standard for GC,≥99.5%(GC)) Nonane 質(zhì)量規(guī)格:standard for GC,≥99.5%(GC) D-二聚體乳膠凝集(latexagglination)法檢測(cè)試劑盒20
正壬(Standard for GC,≥99.5%(GC)) 1-Nonanol 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,≥99.5%(GC) Mouseprostatespecificaigen,PSAELISA試劑盒小鼠前列腺特異性抗原(PSA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
壬酸(Standard for GC ,>99%(GC)) Nonoic acid 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC ,>99%(GC) 小鼠0脂酰肌蛋白聚糖1(GPC1)ELISA試劑盒 ,英文名: GPC1 ELISA Kit
正辛(Standard for GC,>99.5%) n-Octanol 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,>99.5% 人α突觸核蛋白(α-SYN)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanα-Synuclein,α-SYNELISAKit 96T/48T
正辛酸(Standard for GC,≥99.5%(GC)) n-Octanoic acid 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,≥99.5%(GC) 大鼠氧化型(GSSG)試劑盒 Rat oxidizided glathione,GSSG ELISA Kit
十八烷(Standard for GC, ≥99.5% (GC)) Octadecane 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC, ≥99.5% (GC) 英文名稱(chēng)RatTissuefactorpathwayinhibitorELISAKit大鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)規(guī)格:96T/48T
仲辛(Standard for GC,≥99.5%(GC)) 2-Octanol 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,≥99.5%(GC) 鈣ATP酶PMCA蛋白共沉淀分析試劑盒5
二十八烷(standard for GC,≥98.5%(GC)) Octacosane 質(zhì)量規(guī)格:standard for GC,≥98.5%(GC) ELISAKitFABP人脂肪酸結(jié)合蛋白規(guī)格:48T/96T
草酸(Standard for GC,≥99.6%) Oxalic acid dihydrate 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,≥99.6% 小鼠0脂酶D2(PLD2)ELISA試劑盒 ,英文名: PLD2 ELISA Kit
DNA Ladder(500~4000bp)組織磷酸葡萄糖酸脫氫酶(phosphogluconate dehydrogenase;PGD)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞磷酸葡萄糖酸脫氫酶(phosphogluconate dehydrogenase;PGD)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
組織果糖1,6-二磷酸酶(fructose 1, 6-diphosphatase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞果糖1,6-二磷酸酶(fructose 1, 6-diphosphatase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
組織葡萄糖6-磷酸酶(glucose 6-phosph