詳細(xì)介紹
下列是產(chǎn)品的訂購(gòu)信息!產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 貨號(hào) |
DNA Ladder A (25~500bp) | 20次|100次 | GOY-F10132 |
產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
儲(chǔ)存條件:冷凍(-20℃) 技術(shù)規(guī)格 Band 25,50,75,100,150,200,300,400,500 bp Storage Buffer 10mMTris-HCl(pH 7.6),10mMEDTA,0.033%bromophenol blue,0.008%xylene cyanoland 10%glycerol. |
DNA提取流程圖:
實(shí)驗(yàn)步驟
(1)實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養(yǎng)就更好說(shuō)了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過(guò)夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無(wú)水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)掃描檢測(cè)RNA的質(zhì)量
(在抽提過(guò)程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過(guò)TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細(xì)胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞,每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,不取決于細(xì)胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNA有DNA污染。
c.細(xì)胞懸液 離心收集細(xì)胞,每5-10×106動(dòng)物、植物、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol,反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理。
2.將勻漿樣品在室溫(15-30℃)放置5分鐘,使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
3.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質(zhì),脂肪,多糖或胞外物質(zhì)(肌肉,植物結(jié)節(jié)部分等)可于2-8℃10000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時(shí),上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進(jìn)行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機(jī)相,上層為無(wú)色水相和一個(gè)中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中,如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機(jī)相,進(jìn)一步操作見(jiàn)后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙,室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。
兔子α2抗纖溶酶(α2-AP)ELISAKit 5,6-Dihydro-6-methyl-4H-thieno[2,3-b]thiopyran-4-one 中文名: 分子式:C8H8OS2
兔子TH糖蛋白(THP)ELISA試劑盒 6-Aminopenicillanic acid 551-16-6 中文名:6-氨基青霉烷酸 分子式:C8H12N2O3S
兔子S100蛋白(S-100)ELISA試劑盒 6-Aminonicotinic acid 中文名:6-氨基 分子式:C6H6N2O2 度:98.0%
兔子S100蛋白(S-100)ELISAKit 6-Aminoindole 5318-27-4 中文名:6-氨基吲哚 分子式:C8H8N2
兔子S100B蛋白(S-100B)ELISA試劑盒 6-Aminonicotinic acid 中文名:6-氨基 分子式:C6H6N2O2
二甲基亞砜(AR,>99%(GC)) Dimethyl sulfoxide 質(zhì)量規(guī)格:AR,>99%(GC) RatNeuroglobin,NGBELISAKit大鼠腦紅蛋白(NGB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
二甲基亞砜(>99.8%(GC)) Dimethyl sulfoxide 質(zhì)量規(guī)格:>99.8%(GC) EDTA二血液抗凝液100毫升
二甲基亞砜(分子生物學(xué),≥99.9%) Dimethyl sulfoxide 質(zhì)量規(guī)格:分子生物學(xué),≥99.9% MousePulmonarysurfatca-associatedproteinA,SP-AELISA試劑盒小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
二甲基亞砜(多肽合成) Dimethyl sulfoxide 質(zhì)量規(guī)格:多肽合成 小鼠0酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(p-ERK)ELISA試劑盒 ,英文名: p-ERK ELISA Kit
二甲基亞砜(藥用級(jí)) Dimethyl sulfoxide 質(zhì)量規(guī)格:藥用級(jí) 大鼠血管舒緩激肽(BK)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratbradykinin,BKELISAKit 96T/48T
2,2′-雙雙苯(98.0%) 2,2′-Dibromobiphenyl 質(zhì)量規(guī)格:0.98 人電子轉(zhuǎn)運(yùn)黃素蛋白-泛醌氧化還原酶/電子轉(zhuǎn)運(yùn)黃素蛋白脫氫酶(ETFDH)試劑盒 Human ETFDH ELISA kit
2,4,5,6-四氨基硫酸鹽(≥98.0%) 2,4,5,6-Tetraaminopyrimidine sulfate salt 質(zhì)量規(guī)格:≥98.0% RatNeuron-specificenolase,NSEELISAKit大鼠神經(jīng)特異性烯化酶(NSE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
甲酯(99%) Methyl nicotinate 質(zhì)量規(guī)格:0.99 EDTA血液抗凝液100毫升
N-甲基-N-(三甲基硅基)乙酰胺(97%) N-Methyl-N-(trimethylsilyl)acetamide 質(zhì)量規(guī)格:0.97 Mousepyridiniumcrosslink/PyriLinks,PYELISA試劑盒小鼠交聯(lián)物(PY)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
苔黑酚一水合物(98%) Orcinol monohydrate 質(zhì)量規(guī)格:0.98 小鼠0酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISA試劑盒 ,英文名: pERK ELISA Kit
DNA Marker A(25~500bp)細(xì)胞MUSK激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)
組織MET激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)
細(xì)胞MET激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)
組織LYNB激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)
細(xì)胞LYNB激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)