TGW16離心機是利用旋轉(zhuǎn)運動的離心力以及物質(zhì)的沉降系數(shù)或浮力密度的差異進行分離、濃縮和提純生物樣品的一種方法。懸浮液在高速旋轉(zhuǎn)下,由于巨大的離心力作用,使懸浮的微小顆粒 ( 細胞器、生物大分子的沉淀等 ) 以一定的速度沉降,從而使溶液得以分離、濃縮和提純,顆粒的沉降速度取決于離心機的轉(zhuǎn)速、顆粒的質(zhì)量、大小和密度,離心機就是利用離心機轉(zhuǎn)子高速旋轉(zhuǎn)產(chǎn)生的強大的離心力,迫使液體中微??朔U散加快沉降速度,把樣品中具有不同沉降系數(shù)和浮力密度的物質(zhì)分離開。
高速離心機的結(jié)構(gòu)簡單,由電動機、離心轉(zhuǎn)盤、調(diào)速器、定時器、離心套管與底座等部件構(gòu)成。電動機 :是離心機的主件,多為串激式。它包括定子和轉(zhuǎn)子兩部分。串激式電動機有很大的啟動轉(zhuǎn)矩,隨著負載的增加,轉(zhuǎn)速急速下降,空載時轉(zhuǎn)速很高。離心轉(zhuǎn)盤 ( 轉(zhuǎn)頭 ) :離心轉(zhuǎn)盤常用鑄鋁制成,平頂錐形,中間有一圓孔,套在電動機上端的轉(zhuǎn)軸上,然后用螺帽旋緊固定,轉(zhuǎn)盤上有 6-12 個對稱的 45°角的斜孔,以放試管。調(diào)速裝置 :( 控制電動機 ) 有多種 , 如多抽頭變阻器、瓷盤可變電阻器等多種形式。在電源與電動機之間串聯(lián)一只多抽頭扼流圈或瓷盤可變電阻器,改變電動機的電流和電壓,通過旋轉(zhuǎn)或觸摸面板自動控制系統(tǒng),達到轉(zhuǎn)速調(diào)節(jié)。離心套管 : 主要用塑料和不銹鋼制成。塑料離心管透明 ( 或半透明 ),常用性能較好的材料,如聚丙烯(PP),其硬度小,可用穿刺法取出梯度層,但易變形,抗有機溶劑腐蝕性差,使用壽命短。塑料離心管都有管蓋,在臺式高速微量離心機TGW16離心前管蓋必須蓋嚴,防止倒置時漏液。不銹鋼離心管強度大,不變形,能抗熱、抗凍、抗化學腐蝕。
離心分離的效果除了與離心機種類、離心方法、離心介質(zhì)及密度梯度等因素有關(guān)以外,實際操作時,主離心機轉(zhuǎn)速和離心時間的確定、離心介質(zhì)的PH值和溫度等條件也至關(guān)重要。離心加速度的大小取決于轉(zhuǎn)子的轉(zhuǎn)速和顆粒的旋轉(zhuǎn)半徑。在說明離心條件時,往往也用相對離心力場來表示。實際工作中,離心力場的數(shù)據(jù)是指其平均值。即是指在離心溶液中點處顆粒所受的離心力場。離心時間依據(jù)離心方法的不同而有所差別。對于差速離心來說,是指某種顆粒*沉降到離心管底的時間;對等密度梯度離心而言,離心時間是指顆粒*到達等密度點的平衡時間;而密度梯度離心所需的時間則是指形成界限分明的區(qū)帶的時間。對于密度梯度離心和等密度梯度離心所需的區(qū)帶形成時間或平衡時間,影響因素很復雜,可通過試驗后確定。顆粒的沉降時間又稱澄清時間,是指顆粒從離心樣品液液面*沉降到離心管底所需的時間。沉降時間決定于顆粒沉降速度和沉降距離。
溫度和PH值:為了防止分離物質(zhì)的凝集、變性和失活,除了在離心介質(zhì)的選擇方面加以注意外,還必須控制好溫度及介質(zhì)溶液的PH值等離心條件。離心溫度一般控制在4度左右,對于某些熱穩(wěn)定性較好的酶等,離心也可在室溫下進行。但在超速或高速離心時,轉(zhuǎn)子高速旋轉(zhuǎn)會發(fā)熱從而引起溫度升高。故必須采用冷凍系統(tǒng),使溫度保持在一定范圍內(nèi)。
離心介質(zhì)溶液的PH值應(yīng)該是處于酶穩(wěn)定的PH范圍內(nèi),必要時可采用緩沖液。另外,過酸或過堿還可能引起轉(zhuǎn)子和離心機的其他部件的腐蝕,應(yīng)盡量避免。
臺式高速微量離心機TGW16技術(shù)參數(shù):