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皮質(zhì)醇檢測試劑盒操作方法及原理
[背景]:皮質(zhì)醇,是糖皮質(zhì)激素中的一種類固醇激素。在人類中,它由腎上腺中的腎上腺皮質(zhì)束狀帶產(chǎn)生,在壓力和低血糖時釋放,可作為壓力的一個生物標志物。皮質(zhì)醇的產(chǎn)量與ACTH依賴的晝夜節(jié)律相關(guān),在早晨達到峰值,隨后逐漸降低。皮質(zhì)醇在很多基質(zhì)中可被檢測到,如血液、糞便、尿液和唾液。血清中90-95%的皮質(zhì)醇與蛋白結(jié)合,包括皮質(zhì)類固醇結(jié)合球蛋白和血清白蛋白。皮質(zhì)醇主要參與代謝和免疫。在代謝方面,它可促進糖異生、肝糖原沉積和降低葡萄糖利用率。在免疫方面,作為重要的抗炎因子,在過敏、免疫抑制和疾病抵抗中發(fā)揮重要作用。異常的皮質(zhì)醇水平與許多狀況有關(guān),包括前列腺癌、抑郁癥和精神分裂癥。身體組織中皮質(zhì)醇過高是庫欣綜合征的誘因。
[檢測原理]:本試劑盒采用固相競爭酶聯(lián)免疫吸附檢測技術(shù)。兔抗小鼠多克隆抗體預包被在高親和力的酶標板上。皮質(zhì)醇特異性的單克隆抗體加入至孔中,經(jīng)過孵育,與固相抗體結(jié)合。洗滌后,加入辣根過氧化物酶標記的皮質(zhì)醇和未標記的皮質(zhì)醇或樣本,競爭結(jié)合單克隆抗體上有限的結(jié)合位點。在洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后,加入顯色底物,顏色反應的深淺與皮質(zhì)醇的濃度成反比。加入終止液終止反應,在 450 nm 波長(參考波長 570 - 630 nm)測定吸光度值。 樣本類型]:血清、血漿、細胞上清、組織等相關(guān)生物樣本。 [規(guī)格型式]:96孔板、48孔板,可拆卸 [保存條件]:試劑盒未拆開,2-8℃保存。已拆開,標準品-20℃保存,其它2-8℃℃保存。 [有效期]:6個月。
敏感性/Z低檢測濃度計算方式:敏感性等于20個空白對照孔的平均O.D.值加上2個標準差后對應的濃度。樣品的O.D.讀數(shù)只有在高過敏感性指標的時候才具有統(tǒng)計學顯著性。 [變異系數(shù)]:板內(nèi)變異系數(shù)<10%,板間變異系數(shù)<15%。 [回收率]:三組已知的高、中、低濃度樣品,進行五次回收率評估,回收率在85%-115%之間。
[需用戶自己提供的實驗器材和試劑]: 1. 96孔讀板儀器。
2. 自動洗板機.
3. 移液器和槍頭。建議使用多通道移液器/排槍。
4. Eppendorf 管。
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