植物赤霉素含量檢測試劑盒-elisa方法

試劑盒性能：

1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。

2.批內(nèi)變異系數(shù)與批間變異系數(shù)應(yīng)分別小于10%和15% 。

檢測范圍：                                              

3.75 pmol/L - 120 pmol/L

靈敏度：                                              

低檢測濃度小于0.1 pmol/L

實(shí)驗(yàn)原理：

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中植物赤霉素（GA）水平。用純化的植物赤霉素（GA）捕獲抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被的微孔中依次加入植物赤霉素（GA），再與HRP標(biāo)記的檢測抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的植物赤霉素（GA）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中植物赤霉素（GA）含量。

植物標(biāo)本中相關(guān)酶或蛋白的測定：
1、 稱取0.1g（誤差±3%以內(nèi)）新鮮植物組織樣本，在液氮中充分研磨；；
2、 加入樣品體積9倍的提取液（pH 7.4 PBS緩沖液）,
3、 請(qǐng)于4度，8000rpm，離心30分鐘，取上清并暫時(shí)保存于4度待用。