全基因合成實(shí)驗(yàn)操作程序

  以前，實(shí)驗(yàn)室通常用PCR和RT - PCR的方法來獲取某個(gè)基因片段,但是往往因?yàn)闃?biāo)本和模板等原因無法釣取該段基因。如今，我們采用化學(xué)合成的方法人工構(gòu)建基因片段，即:全基因合成拼接技術(shù)?？梢詾閺V大的科研朋友服務(wù)。

基因合成是指在體外合成雙鏈DNA分子的一門技術(shù)與寡核苷酸合成有所不同，穿核苷酸是單鏈的，所能合成的長片段僅為100nt左右，而基因合成則為雙鏈DNA分子合成，所能合成的長度范圍50bp-12 kb?？筛鶕?jù)客戶需求，我公司可以提供全基因合成服務(wù)，速度快、周期短、*。合成的基因可以根據(jù)客戶的需求連接到不同的載體上，終提供的產(chǎn)品包括菌株以及凍干的質(zhì)粒和全基因完整的測序報(bào)告。

全基因合成的適用范圍:

1.自然界中無法以常規(guī)實(shí)驗(yàn)手段得到的基因。

2.研究人員通過自己的意愿設(shè)計(jì)基因序列，以得到自然界中不存在的基因。

3.對已知基因序列進(jìn)行大量密碼子優(yōu)化重排以期達(dá)到對該基因進(jìn)行高效表達(dá)或獲得新的生物特性等研究目的。

服務(wù)優(yōu)勢:

1.合成基因長已達(dá)到10 5KB,已完成基因超過10000條。

2.可以合成重復(fù)序列(重復(fù)次數(shù)無限制).高GC(小于80%).發(fā)夾(參照每200bp小于3個(gè)發(fā)夾為限)連續(xù)單-堿基重復(fù)(GC小于15個(gè),AT小于20個(gè))等富含特殊結(jié)構(gòu)的基因注:特殊結(jié)構(gòu)基因合成的相關(guān)數(shù)據(jù)是根據(jù)我公司曾經(jīng)成功合成過的基因序列所做的總結(jié)，以作為您設(shè)計(jì)基因序列時(shí)判斷是否能順利合成作為參考具體還需以實(shí)際基因序列來定。

3、基因可以克隆到客戶提供或的表達(dá)載體上。

4.免費(fèi)提供基因結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)基因密碼子優(yōu)化,基因克隆表達(dá)方案設(shè)計(jì)等基因合成相關(guān)咨詢服務(wù)。

全基因合成操作程序:

1.我們將對您需要合成的基因全序列進(jìn)行分析,檢查基因內(nèi)部是否含有重復(fù)序列，然后根據(jù)序列的具體情況設(shè)計(jì)合成方案。

2.在得到您認(rèn)可后，我們將立即進(jìn)行單鏈Oligo DNA合成，DNA+#片段拼接等工作。然后把全長基因克隆到載體中，再通過DNA測序確認(rèn)合成基因的正確性。

3.測序結(jié)果如果發(fā)現(xiàn)有錯誤位點(diǎn)。我們會采取相應(yīng)的技術(shù)手段進(jìn)行修復(fù)校對，保證整個(gè)序列的正確性。

注:因基因結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜，并非所有的片段都能順利合成。對于較長的片段或一些復(fù)雜結(jié)構(gòu)如重復(fù)序列、高GC片段等，可能會需要額外的時(shí)間調(diào)整合成方案。如果發(fā)生這種情況，技術(shù)人員會及時(shí)與您聯(lián)系，告知您合成進(jìn)程。所合成的基因- 般克隆于通用載體中,如需克隆在客戶的載體中，我公司會酌情再收取一定的費(fèi)用，并且交貨時(shí)間會適當(dāng)延長。

服務(wù)要求:

1.請您以郵件、書面的形式提供需要合成的基因的序列。

2.請您說明實(shí)驗(yàn)的具體要求:

如:使用何種酶切位點(diǎn)，進(jìn)行克隆，以及需要克隆到何種載體等。

3、本中心將免費(fèi)提供PUC57 - T載體，如果需要裝在其它載體中，請客戶自己提供。

4.簽訂基因臺成技術(shù)保密協(xié)議,支付合成總價(jià)的50%作為預(yù)付款，本公司收到款項(xiàng)后開始合成基因注:基因合成開始日期為公司確認(rèn)收到預(yù)付款后的第--個(gè)工作日

5、基因合成結(jié)束，通知客戶支付余下50%的合成款項(xiàng)

結(jié)果提供:

1.基因合成報(bào)告單一份

2.含目的基因的質(zhì)粒(不少于1ug)-份

3、含目的基因的菌株- -份

4.基因合成的測序圖譜- -份

收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)/服務(wù)周期/提供結(jié)果:

歡迎咨詢詳談，我們會根據(jù)您的方案及需求制定詳細(xì)的服務(wù)協(xié)議。

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