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離心分離PCR后樣品

時間：2023/5/29閱讀：573
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用Hitachi CR—G離心機，R10H轉(zhuǎn)頭分離PCR后（DNA或其他生物大分子）樣品
A液：20％PEG6000，2.5M NaCl 及Isopropanol (異丙醇)
 
分離步驟：
1．用384孔板或96孔板，按比例增加容量，在PCR儀中擴增反應(yīng)后
2．每孔內(nèi)含10ul PCR后樣品及10ul A液
3．微板先用搖床充分混勻。
4．對稱加入P10H轉(zhuǎn)頭（二塊或四塊，384孔板）
5．離心10,000rpm（約13,000xg）×10分，4℃，加速“9"，減速“9"
6．取出微孔板
7．用Kimtowels 紙貼在R10轉(zhuǎn)頭放微板架的內(nèi)壁
8．去掉微板蓋并把微板倒過來放入R10H 轉(zhuǎn)頭微板架。
9．預(yù)置轉(zhuǎn)速1000rpm，10分，4℃，加速“9"，減速“9"，在速度顯示到達300rpm時停車。
10．從微板中取出轉(zhuǎn)頭，沉淀可作出進一步實驗。
 
特點：1. 轉(zhuǎn)速高（一般微板轉(zhuǎn)頭都在5000rpm，4000xg以下）回收率高。
      2. 沉淀緊，反向低速離心后上清全部被紙吸干。
      3. 用于DNA測序前樣品制備最合適。

離心機

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