研究利用基因定點修飾技術CRISPR-Cas系統(tǒng),可快速地在單倍體干細胞上進行定位的基因修飾或敲除,并且處理后的細胞仍能維持單倍體和多能性狀態(tài)。ELISA試劑盒尤為重要的是,該工作證明了大鼠單倍體胚胎干細胞同樣具有替代精子與卵母細胞“受精”并產生健康大鼠的能力
通過種系嵌合和替代精子進行卵胞質注射兩種途徑,該團隊都成功獲得了健康的攜帶基因修飾的大鼠,從而證明大鼠孤雄單倍體胚胎干細胞可以將基因修飾快速地遺傳給后代,為研究基因功能提供了便利。應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠性激素結合球蛋白elisa試劑盒 水平。用純化的大鼠性激素結合球蛋白elisa試劑盒使用說明書抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入類性激素結合球蛋白elisa試劑盒 ,ELISA試劑盒再與HRP標記的類性激素結合球蛋白elisa試劑盒 抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的。顏色的深淺和樣品中的類性激素結合球蛋白elisa試劑盒 呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度,通過標準曲線計算樣品中大鼠性激素結合球蛋白elisa試劑盒 濃度。
單倍體胚胎干細胞同時具有單倍體細胞和胚胎干細胞的特性,由于其只含有一套染色體,不存在等位基因在基因功能上的補償作用,因此是研究隱性基因功能的理想模型。同時,其胚胎干細胞的特性又可以將基因修飾直接遺傳給后代,從而避免了其他轉基因方法種系嵌合等方面的要求,可以很大提高基因修飾的效率及應用范圍。 ELISA試劑盒此次的研究成果從小鼠之外的哺乳動物中獲得了具有發(fā)育功能的單倍體胚胎干細胞系,而且利用CRISPR-Cas技術完成對大鼠單倍體胚胎干細胞的多基因敲除,為建立用于大規(guī)?;蚝Y選的純合的基因突變細胞庫打下基礎。鑒于大鼠在生理上比小鼠更類似于人類,這一工作將對人類疾病模型研發(fā)和開展基因功能研究起到重要的推動作用。
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