酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）自問(wèn)世以來(lái)，以其敏感性高，特異性強(qiáng)，操作簡(jiǎn)便、安全，開(kāi)創(chuàng)了免疫學(xué)科研的新紀(jì)元在科研方面得到了廣泛的應(yīng)用。但是人ELISA試劑盒在它的研究、生產(chǎn)及使用中常常會(huì)碰到非特異性顯色問(wèn)題，ELISA試劑盒特異性、檢驗(yàn)標(biāo)本中含酶標(biāo)記物的干擾物，操作不當(dāng)?shù)纫蛩囟紩?huì)導(dǎo)致這樣的結(jié)果。本文就在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)生的一些原因及如何采取一些措施，消除非特異性顯色作以分析。

在ELISA中正確的洗滌是保證得到可重復(fù)結(jié)果的關(guān)健一步，應(yīng)引起操作者重視。無(wú)論是手工操作還是機(jī)器操作，得出不正確的結(jié)果常與不正確的洗滌有關(guān)，ELISA就是靠洗滌來(lái)達(dá)到分離游離和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的。通過(guò)洗滌以消除殘留在板孔中沒(méi)能與固體抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)，以及在反應(yīng)過(guò)程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。

每種試劑都有其*反應(yīng)模式，其中溫度和溫育時(shí)間控制是重要因素。因孵育溫度高，反應(yīng)時(shí)間長(zhǎng)，會(huì)造成整板本底高，陽(yáng)性率高。溫育一般用濕盒或水浴，人ELISA試劑盒反應(yīng)板不宜疊放，以保證各板溫度都能迅速平衡，為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋。