目前，檢測HIV抗體常用的初篩方法有金標(biāo)層析法和ELISA法。由于ELISA試劑盒法實(shí)驗(yàn)時間較長，對設(shè)備、工作環(huán)境、實(shí)驗(yàn)人員操作要求相對較高，因此中、小型以及偏遠(yuǎn)地區(qū)的實(shí)驗(yàn)室難以全面開展，而金標(biāo)層析法具有操作簡單、快速等優(yōu)點(diǎn)已被很多醫(yī)療單位用來進(jìn)行HIV抗體初篩。但在試劑的檢測診治當(dāng)中，由于HIV抗體初篩結(jié)果與確認(rèn)結(jié)果不符而引發(fā)的醫(yī)療糾紛時有發(fā)生，因此根據(jù)不同的醫(yī)療環(huán)境和單位選擇合適的檢測方法十分重要。本文對用兩種方法檢測HIV抗體初篩陽性的結(jié)果與確認(rèn)結(jié)果進(jìn)行分析比較，旨在探討金標(biāo)層析法與ELISA法檢測HIV抗體在實(shí)際工作中的適用性，為合理選擇實(shí)驗(yàn)方法提供理論基礎(chǔ)。

1  資料與方法

    1.1  一般資料  

所有血液樣本均來自醫(yī)院2005年門診和住院病人，共1208例，其中男648例，女560例，年齡0.5～90歲，平均39歲。用ELISA法和金標(biāo)層析法同時檢測其HIV抗體，所有樣本均在采樣后4h內(nèi)檢測完畢。

    1.2  方法

    1.2.1  金標(biāo)層析法  采用雙抗原夾心法原理，10～30min內(nèi)觀察結(jié)果。

1.2.2  ELISA法  利用雙抗原夾心法，操作步驟嚴(yán)格按ELISA試劑盒說明書進(jìn)行。

1.3   試劑  

兩種方法均使用上海伊麗薩生物科技有限公司生產(chǎn)的試劑，該試劑經(jīng)國家藥檢所批，批檢合格，且都在有效期內(nèi)（ELISA法試劑批號分別為：2005036601、2005056602、2004126608，金標(biāo)層析法試劑批號分別為：2005040304、2005052501、2005011905）。

    1.4  儀器  洗板機(jī)Anth.s Fludo；酶標(biāo)儀Anth.s 2010。

    1.5  統(tǒng)計(jì)學(xué)分析  檢測結(jié)果采用χ2檢驗(yàn)進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，以P<0.05為差異有顯著性。

2  結(jié)果

    對兩種方法檢測結(jié)果進(jìn)行分析比較， ELISA試劑盒與金標(biāo)層析法檢測HIV抗體的結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計(jì)顯示差異無顯著性（χ2=0.65；P>0.05）

3  討論

    自1985年我國報(bào)道*例艾滋病以來［1］，艾滋病在我國的流行趨勢日趨嚴(yán)峻，近幾年更是進(jìn)入一個快速增長期［2］。到目前為止，艾滋病尚無有效的治療措施，因此，對可疑人群的檢測和篩查顯得尤為重要。

    近年，艾滋病的檢測手段被不斷更新和利用。自20世紀(jì)70年代，F(xiàn)anlk等建立了ELISA技術(shù)后［3］，該技術(shù)便廣泛用于臨床免疫檢測。用于檢測艾滋病的ELISA法第三代試劑，采取雙抗原夾心法原理，利用酶催化底物反應(yīng)的放大作用［3］，用來提高特異性抗原抗體反應(yīng)的敏感性。其特點(diǎn)為特異性和靈敏度高、準(zhǔn)確性好。而金標(biāo)層析法是繼ELISA法之后發(fā)展起來的一種膜固相免疫測定，其以膠體金作為標(biāo)記物，利用層析作用來檢測抗原或抗體［4］。用于檢測HIV抗體金標(biāo)層析法現(xiàn)在已廣泛使用于臨床和各醫(yī)療機(jī)構(gòu)。該方法操作簡便、快速，無需特殊設(shè)備，通過實(shí)驗(yàn)檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)，兩種方法均有較高的靈敏度，金標(biāo)法陽性的11例標(biāo)本用ELISA法檢測有4份標(biāo)本陰性、7份標(biāo)本陽性，但兩者差異無顯著性（P>0.05），均可適用于醫(yī)學(xué)檢測。然而在實(shí)際的臨床試驗(yàn)中，選用HIV抗體初篩試劑時，應(yīng)視不同情況而定。如本實(shí)驗(yàn)的檢測結(jié)果中，11例金標(biāo)法初篩陽性的樣本，經(jīng)省CDC確認(rèn)7例為陽性，7例ELISA法檢測陽性的樣本經(jīng)省CDC確認(rèn)均為陽性?？梢?，ELISA法的特異性高于金標(biāo)層析法，有較高的陽性預(yù)期值。而金標(biāo)層析法存在較高的假陽性率，其產(chǎn)生的原因多數(shù)還不清楚，排除技術(shù)因素外，可能主要是因?yàn)榻饦?biāo)法受實(shí)驗(yàn)條件和時間的限制，與ELISA試劑在制作技術(shù)上還存在一定的差異，還有一些針對HLA抗原的抗體、患者自身免疫性疾病、寄生蟲、其他病毒以及高丙種球蛋白癥病人的血清標(biāo)本也常容易出現(xiàn)假陽性反應(yīng)［1］。

    在醫(yī)院就診的過程中，因HIV-Ab初篩陽性而確認(rèn)實(shí)驗(yàn)陰性導(dǎo)致的醫(yī)療糾紛時有發(fā)生。因患者不理解或醫(yī)患之間溝通不夠，勢必給醫(yī)院的醫(yī)療服務(wù)質(zhì)量和醫(yī)療形象造成負(fù)面影響，也給受檢者造成巨大的精神壓力和恐慌心理。因此選用一種特異性高、有較高的陽性預(yù)期感、能zui大限度保證發(fā)現(xiàn)真正HIV感染者的試劑尤為重要，ELISA試劑即具有以上優(yōu)點(diǎn)。所以大、中型醫(yī)院在進(jìn)行HIV-Ab初篩時，除急需手術(shù)或輸血的病人用金標(biāo)層析法外，其余標(biāo)本應(yīng)盡量采用ELISA試劑盒法，以降低假陽性率，減少醫(yī)患糾紛，其他如進(jìn)行艾滋病流行病學(xué)監(jiān)測［1］，對特定人群HIV感染狀況和發(fā)展趨勢進(jìn)行無關(guān)聯(lián)和匿名調(diào)查與檢測；對流行病學(xué)、臨床、病毒學(xué)或HIV相關(guān)的研究對象進(jìn)行自愿檢測時也應(yīng)該選擇特異性高的ELISA試劑。金標(biāo)試劑可能由于本身反應(yīng)條件的限制，其質(zhì)量還有待進(jìn)一步提高，但該方法簡便、快速、檢測敏感度高、假陰性率低，可適合街頭獻(xiàn)血員篩選的大批量檢測，經(jīng)濟(jì)合算，獻(xiàn)血者也樂意接受，可使無償獻(xiàn)血的血液合格率得到明顯提升，對提高血液質(zhì)量、保障輸血安全、減少血液浪費(fèi)、進(jìn)一步推廣無償獻(xiàn)血工作起到了積極作用。金標(biāo)試劑還具有易于保存（環(huán)境溫度為2～30℃）、儲存時間長（2年）、不浪費(fèi)等諸多優(yōu)點(diǎn)，對HIV-Ab檢測標(biāo)本zui少、不具備ELISA測定條件的偏遠(yuǎn)地區(qū)中、小型檢驗(yàn)科也尤為適用。