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生物素系統(tǒng)在ELISA試劑盒中的應(yīng)用有多種形式,可用于間接包被,亦可用于終反應(yīng)放大??梢栽诠滔嗌舷阮A(yù)包被親和素,原用吸附法包被固相的抗體或抗原與生物素結(jié)合,通過親和素-生物素反應(yīng)而使生物素化的抗體或抗在相化。這種包被法不僅可增加吸附的抗體或抗原量,而且使其結(jié)合點(diǎn)充分暴露。另外,在常規(guī)ELISA試劑盒中的酶標(biāo)抗體也可用生物素化的抗體替代,然后連接親和素-酶結(jié)合物,以放大反應(yīng)信號(hào)。
親和素與生物素的結(jié)合,雖不屬免疫反應(yīng),但特異性強(qiáng),親和力大,兩者一經(jīng)結(jié)合就極為穩(wěn)定。由于1個(gè)親和素分子有4個(gè)生物素分子的結(jié)合位置,可以連接更多的生物素化的分子,形成一種類似晶格的復(fù)合體。因此把親和素和生物素與ELISA試劑盒偶聯(lián)起來,就可大大提高ELISA試劑盒的敏感度。
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