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通常所使用的ELISA試劑盒或其它試劑,必須是經(jīng)國家食品藥品監(jiān)督管理局注冊批準、批檢合格、臨床評估質(zhì)量優(yōu)良,并且均在有效期內(nèi)使用。
1、ELISA試劑盒的選擇不同批號試劑組分不得混用,過期的試劑一律不得使用,首先提升。
2、 ELISA試劑盒樣品的采集與保存
用于檢測的標本應(yīng)保持新鮮,標本的采集應(yīng)盡量避免溶血,因紅細胞破裂可釋放過氧化物酶活性物質(zhì),干擾結(jié)果,會出現(xiàn)假陽性;標本如果受細菌污染,會因菌體中含有內(nèi)源性過氧化物酶而出現(xiàn)假陽性;混濁或有沉淀的血清樣品應(yīng)離心,待澄清后方可檢測,避免對結(jié)果造成影響。
用于HIV抗體檢測的血清或血漿樣品應(yīng)存放于-20 ℃以下,短期(1周內(nèi))進行檢測的樣品可存放于2 ℃~8 ℃。融解時應(yīng)上下顛倒充分混勻,動作要輕緩,避免產(chǎn)生氣泡。同時應(yīng)注意避免樣品反復(fù)凍融,否則會造成樣品抗體效價降低,影響其結(jié)果。
3、 加樣
加樣前應(yīng)注意將微孔板條從冷藏環(huán)境中取出放置室溫,待試劑平衡后方可使用,未用完者需放入有干燥劑的密封袋中保存。整個HIV抗體檢測必須符合《全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范》,嚴格防止交叉感染。操作時必須戴手套、穿工作衣,嚴格執(zhí)行消毒隔離制度。
加樣要用微量移液器ELISA試劑盒(要求準確性高并定期進行校正),ELISA試劑盒按規(guī)定的量加入孔內(nèi),避免加在孔壁的邊緣,垂直加樣,不要使吸頭碰到酶標板孔上的已包被的抗原,加樣時盡量慢吸快放,同時注意不要濺出,避免產(chǎn)生氣泡。
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