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植物Elisa試劑盒用純化的人白介素抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入白介素,再與HRP標(biāo)記的白介素抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
植物Elisa試劑盒樣品收集、處理及保存方法
(1)血清:使用不含熱原和內(nèi)的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
(2)血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
(3)細(xì)胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
(4)組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
(5)保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
操作時(shí),植物Elisa試劑盒需注意:
1 不同廠家生產(chǎn)的試劑盒因生產(chǎn)工藝和操作方法略有不同,務(wù)必按照植物ELISA試劑盒,檸檬酸合酶(CS)ELISA檢測(cè)試劑盒說明書嚴(yán)格操作,否則容易產(chǎn)生檢測(cè)結(jié)果的不確定性
2 若不同批號(hào)植物ELISA試劑盒,檸檬酸合酶(CS)ELISA檢測(cè)試劑盒的不同組分(A液或酶工作液),或不同試劑的不同組分進(jìn)行交叉使用,有可能出現(xiàn)顯色淺或本底高,花板等情形。
3 反應(yīng)時(shí)間的誤差,做大量標(biāo)本時(shí),孔和后一孔以及一些特殊標(biāo)本可能影響較大。
4 臨界值附近標(biāo)本波動(dòng)為正常現(xiàn)象,任何試劑均不可避免。可以考慮將標(biāo)本做奇數(shù)次復(fù)檢。
5 加樣時(shí)樣品量誤差,對(duì)于陰或很陽(yáng)的標(biāo)本影響不大,但對(duì)閾值附近的標(biāo)本影響很大,建議校對(duì)加樣器。
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