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一直以來,ELISA試劑盒以其敏感性高、特異性強、重復性好的長處,在科研中深受廣闊,科研工作者的喜歡.而市面上各種試劑盒,不計其數(shù).讓咱們都發(fā)生了,挑選性綜合癥,也挑不出自已的那個試劑盒.如今咱們公司列出了一下,一些選購的常識,期望能為咱們選購時提代一協(xié)助.
單克隆抗體和多克隆抗體都可以用于ELISA試劑盒,ELISA試劑盒實際上有時候二者作用非常好。例如,對于雙抗夾心法而言,用多抗進行捕獲而單抗進行檢查有時更有協(xié)助。多抗可以保證捕獲一切抗原,隨后單抗再特異性檢查具有特定抗原表位的抗原。
假如抗體間發(fā)生沖突或穿插反響就會影響全部試驗的特異性。其間抗體來歷所帶來的兼容性即是穿插反響的一個要素。雖然如今采購源自動物的抗體越來越簡單,咱們?nèi)杂斜匾姓J一下是不是會發(fā)生穿插反響的疑問。在用雙抗夾心法進行ELISA檢查時,檢查用的二抗有必要特異性對于檢查一抗,而不能與捕獲抗體起反響。假如檢查用二抗與捕獲抗體,試驗特異性就會大打折扣。一般咱們選用源自不同宿主的捕獲抗體和檢查一抗,來避免上述疑問。
ELISA試劑盒雖然有多種類型,不過它們都有一個一起特色,即是進行抗原捕獲。一般捕獲方式包含將抗原吸附到微孔板或許用微孔板上的抗體進行捕獲。In-cell ELISA和酶聯(lián)免疫斑駁ELISPOT是兩種特別的類型,In-cell ELISA需求將微孔板中培養(yǎng)的細胞進行固定和通透化,然后再用抗體原位檢查。ELISPOT有點像蛋白印跡Western blot,先在帶膜的微孔板中培養(yǎng)細胞,然后在膜上檢查細胞排泄的抗原形成斑駁。此外,咱們還需求依據(jù)本身需求挑選96孔板或是384孔板進行ELISA試驗。
如今檢查ELISA有很多途徑,咱們可以依據(jù)自個的偏好進行挑選。一般ELISA檢查的是酶促反響的可溶性產(chǎn)物,抗體上有相應(yīng)的酶(例如一般運用的辣根過氧化物酶HRP),而反響系統(tǒng)中增加有相應(yīng)的底物(如3,3-二氨基聯(lián)苯胺DAB)。這種酶促反響生成具有特征性的色彩,可以通過分光光度計進行檢查,堿性磷酸酶AP也是一種常用酶。酶可以在一抗上,也可以在二抗上,還可以運用鏈霉親和素符號的酶與親和素符號的一抗。此外ELISA的成果檢查還包含放射性檢查、熒光檢查、化學發(fā)光或顯色法檢查等。
以上是咱們就客戶在采購ELISA試劑盒時咨詢疑問,宣布的一點鄙見,期待咱們拍磚糾正.
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