油紅O染色實驗服務
油紅0染色簡介:
油紅0脂肪染色法是指在日常病理診斷和科研工作中為了顯示組織內(nèi)的脂肪常采用油紅0進行染色的方法,油紅0為脂溶性染料,在脂肪內(nèi)能高度溶解,可特異性的使組織內(nèi)甘油三酯等中性脂肪著色。
油紅0染色實驗意義:
正常情況下,除脂肪細胞外其他細胞內(nèi)-般不見或僅見少量脂滴。在病理狀態(tài)下如這些細胞中出現(xiàn)脂滴或脂滴明顯增多,特別是在心、肝.腎等實質(zhì)器官發(fā)生脂肪變性時,胞漿內(nèi)出現(xiàn)大小不一的空泡, 這時常需鑒別空泡性質(zhì),用脂肪染色來區(qū)分是脂肪變性還是水樣變性或糖原貯留。在動脈粥樣硬化時,內(nèi)皮細胞下的脂質(zhì)沉著,用脂肪染色能將脂質(zhì)清晰地顯示出來。由脂肪組織病變所弓|起的脂肪栓塞可用脂肪染色顯示栓子內(nèi)的脂質(zhì),從而確診脂肪栓塞。用于腫瘤組織的鑒別診斷,由脂肪組織所發(fā)生的腫瘤在與其他組織來源的腫瘤相區(qū)分時,可以借助脂肪染色,脂肪組織所發(fā)生的腫瘤,脂肪染色為陽性。并可根據(jù)所顯示的細胞形態(tài)特點與類似腫瘤進行鑒別,腎透明細胞癌與腎上腺瘤,卵巢纖維瘤與卵泡膜細胞瘤。皮脂腺瘤與鱗狀細胞癌的鑒別診斷有意義。
實驗步驟:
1.固定:將冰凍切片復溫干燥10min;細胞爬片4%多聚甲醛固定15min,PBS漂洗3次, 5min/次。
2.染色:入油紅0工作液孵育10-15min;細胞爬片破膜10-15min, PBS漂洗3次,5min次, 入油紅工作液37°C染色1-2h。
3.分化: 75%酒精分化2s,水洗1min。
4、復染細胞核: Harris蘇木素復染1-2min左右, 自來水洗,1%的鹽酸酒精分化數(shù)秒,自來水沖洗,氨水返藍,流水沖洗。
5、封片:用紙巾吸去周邊水分,甘油明膠封片。
實驗結果:
脂滴呈橘紅色至鮮紅色:細胞核呈深藍色。
實驗技巧:
1.油紅0是對脂類物質(zhì)進行染色,石蠟切片在處理過程中脂類物質(zhì)無法保存,所以石蠟切片不能進行油紅0染色。
2.油紅0染液使用一段時間后,染出的脂滴顏色會偏黃,此時就需要更換染液。
3.油紅染色時,動作要輕,因為脂滴易移位,并且在封片時應避免蓋玻片滑動。
實驗代做服務:
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