姬姆薩染色液(Giemsa Stain,即用型)
姬姆薩染色液(Giemsa Stain,即用型)
姬姆薩色素(又稱吉姆薩色素)是由天青Ⅱ與伊紅混合而成,Giemsa 染色原理和結(jié)果與瑞氏染色基本相同,姬姆薩染色液對胞漿著色力較強(qiáng),能較好的顯示胞漿的嗜堿性程度,特 別是對血液和骨髓細(xì)胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜堿性顆粒,著色清晰,但是對胞核著色偏深, 核結(jié)構(gòu)顯色不佳,故姬姆薩染液常與瑞氏染液聯(lián)合使用。 Giemsa Stain 以進(jìn)口的姬姆薩色素、甲醇為主要原料,含 *襯染劑,經(jīng)研磨配制而成,能呈現(xiàn)出清晰的細(xì)胞染色效果。經(jīng)常用于組織切片、血液和細(xì)胞涂片、細(xì)菌、染色體顯帶、原生動物寄生 蟲等染色。嗜酸性顆粒為堿性蛋白質(zhì),與酸性染料伊紅結(jié)合,染粉紅色,稱為嗜酸性物質(zhì); 細(xì)胞核蛋白和淋巴細(xì)胞胞漿為酸性,與堿性染料美藍(lán)或天青結(jié)合,染紫藍(lán)色,稱為嗜堿性物 質(zhì);中性顆粒呈等電狀態(tài)與伊紅和美藍(lán)均可結(jié)合,染淡紫色,稱為中性物質(zhì)。
產(chǎn)品組成:
Giemsa Stain(即用型) 100ml 500ml RT 避 光
自備材料:
1、 甲醇、乙醇
2、 蒸餾水
3、 (可選)0.1%~0.5%乙酸
4、 顯微鏡
操作步驟(僅供參考):
(一)涂片染色
1、常規(guī)方法制備血液涂片或骨髓涂片,待涂片自然干燥后,用甲醇固定 2~3min。
2、將血液涂片或骨髓涂片放置染色架上,滴加 Giemsa Stain(即用型)覆蓋涂片,室溫或加
熱染色 10~15min。
3、用自來水或蒸餾水從玻片一端緩慢的輕輕沖洗。
4、(可選)0.1%乙酸分化數(shù)秒。
5、干燥,鏡檢。
染色結(jié)果:
嗜酸性顆粒嗜堿性顆粒中性顆粒
(二)組織切片染色
1、常規(guī)固定組織,常規(guī)脫水包埋。
2、切片 5μm,常規(guī)脫蠟至水。
3、蒸餾水清洗 2 次,每次 1~2min。
粉紅色紫藍(lán)色淡紫色
4、入 Giemsa Stain(即用型),浸染 12~24h。蒸餾水稍清洗。
5、0.5%乙酸清洗 1~2min。自來水稍沖洗。
6、無水乙醇迅速脫水 3 次,每次 5~10s。
7、二甲苯透明,中性樹脂封固。
染色結(jié)果:
細(xì)胞核 藍(lán)色至紫色
胞質(zhì)細(xì)胞
淡藍(lán)色
結(jié)締組織 淡紅色
注意事項(xiàng):
1、血液涂片或骨髓涂片應(yīng)厚薄均勻,否則影響染色效果。
2、涂片染色中 Giemsa 染色后,請勿先去除染液或直接對涂片用力沖洗。
3、如果染色過深或過淺,應(yīng)調(diào)整染色時間或染色液的濃度。
4、Giemsa 涂片染色和組織切片染色中,pH 值對染色有一定影響,載玻片應(yīng)清潔、無酸堿污染,否則影響染色效果。
5、染色液經(jīng)稀釋后液面應(yīng)金屬光澤則表示染液有染色作用,否則染色液可能失效。
6、Giemsa 組織切片染色中,染色后需用大量 0.1~0.5%乙酸急速沖洗,避免浮面沉淀物
污染切片后難以洗脫。
7、0.5%乙酸分化常用于 Giemsa 組織切片染色,如有必要亦可用于細(xì)胞涂片,但其濃度應(yīng)
適量下調(diào)。0.5%乙酸分化切片時,切片呈粉紅色即可終止。
8、Giemsa 組織切片染色中,無水乙醇脫水要迅速,否則切片易褪色。
9、染色液可重復(fù)使用,但不宜重復(fù)多次,若有沉淀物應(yīng)過濾后使用。
有效期: 24 個月有效。