組織芯片微陣列定制技術(shù)服務(wù)
實驗技術(shù)簡介:
組織芯片(issue chip),也稱組織微陣列(tissue microarrays),生物芯片技術(shù)的一個重要
分支,組織芯片技術(shù)是將幾十至.上千個小組織切片集中于-張載片 上形成的縮微組織陣列,具有體積小、信息含量高、高效低耗和可比性強的優(yōu)點。該技術(shù)問世十年以來以其大規(guī)模、高通量、 標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點得到大范圍的推廣應(yīng)用。組織芯片與基因芯片和蛋白質(zhì)芯片一起構(gòu)成了生物芯片系列,使人類第--次能夠有效利用成百上千份組織標(biāo)本,在基因組、轉(zhuǎn)錄組和蛋白質(zhì)組三個水平上進行研究,被譽為醫(yī)學(xué)、生物學(xué)領(lǐng)域的--次革命。組織芯片技術(shù)可以與其他很多常規(guī)技術(shù)如免疫組織化學(xué)(HC)、核酸原位雜交(ISH)、光原位雜交(FISH)等方法結(jié)合應(yīng)用,它的應(yīng)用領(lǐng)域正在不斷地拓展。
實驗操作流程:
制作組織芯片空心蠟?zāi)?/span>
利用組織芯片空心蠟?zāi)3尚湍>撸?/span>--次成型制作組織芯片空心蠟?zāi)?,具體操作如下:
1、將石蠟放入組織芯片制備系統(tǒng)熔蠟盤內(nèi)加熱熔化,熔蠟盤內(nèi)放入一片適當(dāng)大小的硬質(zhì)光面塑料薄板。將空心蠟?zāi)3尚涂虼罂诔缕椒庞谌巯灡P中的塑料薄板上,調(diào)整熔蠟盤內(nèi)石蠟的量,使熔化石蠟平面高出空心蠟?zāi)3尚涂蚣s2 mm。
2、將無刃陣列管針管口朝下放置于組織芯片制備系統(tǒng)加熱板上預(yù)熱(70 °C)約10 min,平穩(wěn)垂直插入上述空心蠟?zāi)3尚涂颉?/span>
3、平穩(wěn)移開熔蠟盤,室溫冷卻石蠟數(shù)分鐘,熔蠟盤中石蠟呈半凝狀態(tài)時,下壓空心蠟?zāi)?成型框活動頂板,使其貼近蠟?zāi)3尚涂颉?/span>
4、用小刀將空心蠟?zāi)3尚涂蛩闹苁瀯濍x,繼續(xù)室溫冷卻石蠟數(shù)分鐘,熔蠟盤中不再有任何能流動的液體狀石蠟。
5、將熔蠟盤放回組織芯片制備儀上加溫數(shù)秒鐘,熔蠟盤底部石蠟開始熔化時迅速整體移除陣列管針、蠟?zāi)3尚涂?、蠟?zāi)3尚涂騼?nèi)的蠟?zāi)!?/span>
6、插入陣列管針針芯,推出并去除進入陣列管針內(nèi)的石蠟,拔除陣列管針針芯,去除蠟?zāi)3尚涂蛲獠繗埩舻氖灐?/span>
7、使用組織芯片空心蠟?zāi)0文Qb置,均勻拔除陣列管針, 去除蠟?zāi)3尚涂蚧顒禹敯逡约跋災(zāi)3尚涂蛑苓厷埩舻氖?。組織芯片空心蠟?zāi)V苽渫戤?。組織芯片空心蠟?zāi)o需從蠟?zāi)3尚涂蛑腥〕觥?/span>
制作組織芯片石蠟塊
1、目標(biāo)組織定位:組織芯片供體蠟塊常規(guī)病理切片1張,厚4μm,常規(guī)HE染色后進行組織病理診斷閱片,在組織切片的指引下,對相應(yīng)供體蠟塊進行目標(biāo)組織定位標(biāo)記。
2、組織芯片蠟芯取材與點樣: 將蠟塊放入適當(dāng)溫度的熱水中預(yù)熱軟化片刻,應(yīng)用組織芯片制備系統(tǒng)的芯月石蠟組織芯取樣器鉆取目標(biāo)組織柱。目標(biāo)組織柱逐-點樣于組織芯片空心蠟?zāi)V械奈恢谩S脤嵭膯吾樦?將目標(biāo)組織柱輕輕壓平, 使其處于同-切片平面。將裝滿組織芯的蠟?zāi)F叫幸浦烈粔K薄銅板上,加熱銅板數(shù)秒至貼近銅板的蠟?zāi)I约尤刍?,迅速移除銅板,室溫冷卻數(shù)秒后去除銅板。
3、二次包埋組織芯片石蠟塊:芯片組織面朝下,將點好樣的組織芯片蠟塊連同蠟?zāi)3尚涂蚍湃胧⒂猩倭咳刍灥娜巯灡P中(熔化石蠟的深度約4 mm),數(shù)秒種后即可肉眼觀察到熔化的石蠟浸入到石蠟組織芯與蠟?zāi)?椎拈g隙。移除熔蠟盤,將塑料石蠟包埋盒放于蠟?zāi)3尚涂蛏?用勺舀取熔化的石蠟倒入包埋中,室溫冷卻數(shù)分鐘,石蠟半凝狀態(tài)時用小刀劃離蠟?zāi)3尚涂蛑車氖?。石?凝固后,復(fù)加熱熔蠟盤移除二次包埋好的組織芯片石蠟塊。
4、去除蠟?zāi)3尚涂蛞约八芰鲜灠窈兄苓厷埩羰?,輪流加熱蠟?zāi)3尚涂蛩闹苓吙?,使緊貼其邊框內(nèi)側(cè)的石蠟熔化,取出成型的組織芯片石蠟塊。根據(jù)不同的研究目的,將組織芯片石蠟切片鋪于凈潔的或經(jīng)過其他特殊處理的載玻片上,繼續(xù)應(yīng)用于常規(guī)HE染色、免疫組織化學(xué)染色以及原位雜交等細胞學(xué)或分子生物學(xué)檢測。
實驗注意事項:
客戶提供:
1、實驗對象為組織樣品,取適量(250~500mg) 新鮮組織樣品或正確保存的組織樣品,加1ml含蛋白酶抑制劑的總蛋白抽提試劑,勻漿后抽提總蛋白。
2、實驗對象為細胞樣品,每份樣品取1x106 ~ 1x107細胞,PBS清洗細胞,去PBS加0. 1ml~1ml含蛋白酶抑制劑的總蛋白抽提試劑抽提總蛋白。
3、實驗對象為血清,則直接進入步驟3。
交付標(biāo)準(zhǔn):
1、芯片檢測數(shù)據(jù)
2、完整的實驗操作規(guī)程、實驗報告(含軟件分析結(jié)果)以及實驗材料
服務(wù)優(yōu)勢
1、擁有專業(yè)病理診斷醫(yī)師進行閱片,對原有診斷進行確認,并統(tǒng)--診斷標(biāo)準(zhǔn)。
2、做到切片及供體蠟塊雙標(biāo)記,確保組織采樣的準(zhǔn)確性。
3、采用高品質(zhì)進口預(yù)制備受體蠟塊,點陣排列整齊美觀,并有多種規(guī)格可以選擇;進口石蠟熱穩(wěn)定性佳,能確保組織芯與受體蠟塊結(jié)合緊密。
4、擁有專業(yè)的病理技術(shù)員進行切片,每張切片不漏點跳點,終提供組織陣列完整的切片15套。
服務(wù)內(nèi)容(價格咨詢)
1、閱片服務(wù):專業(yè)病理診斷醫(yī)師進行閱片,并同步完成取樣點標(biāo)記,30元/例。
2、組織芯片蠟塊制作
3、芯片蠟塊切片
4、兔疫組化染色
5、兔疫組化染色結(jié)果判讀
收費標(biāo)準(zhǔn)/服務(wù)周期/提供結(jié)果:
歡迎咨詢詳談,我們會根據(jù)您的方案及需求制定詳細的服務(wù)協(xié)議。
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實驗代做服務(wù):
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