實驗意義
1.可應用于闡明基因組結構與功能以及基因之間相互作用的科學,對于探索基因在生命活動中的作用及其機制具有重要意義。
2.能夠為一些疾病提供新的診斷方法和治療方法，可有助于醫(yī)生獲得更多治療信息并進行個性化精準醫(yī)療。
實驗原理及步驟
1. siRNA的設計和選擇:根據(jù)研究目的選擇合適的數(shù)據(jù)庫及軟件篩選靶序列的siRNA,通常需要設計多個siRNA,找到zui you zui有效的siRNA序列;
2. siRNA的制備:常用的體外制備方法有化學合成、體外轉錄、長片段dsRNA經RNase Il類降解，以及通過siRNA表達質粒載體或者病毒載體以及PCR制備的siRNA表達框架(siRNA expression cassettes, SECs)在細胞中表達制備siRNA;
3. siRNA的轉染: siRNA. siRNA表達載體或者siRNA表達框架轉染進入細胞的方法主要有磷酸鈣共沉淀轉染、電穿孔轉染機械法(顯微注射和基因槍) . 陽離子脂質體試劑轉染;
4.檢測靶基因的表達: WB等方法檢測靶基因的表達或者可以通過標記siRNA(如熒光標記)分析其表達，還可用作siRNA胞內定位和雙標記實驗來追蹤轉染過程以及靶基因表達沉默過程。
實驗周期及交付標準
1.實驗周期: 2-4周
2.交付標準:質粒、片段驗證結果、實驗報告(實驗步驟.試劑、儀器等)
需確認的信息
1.基因的種屬及ID號
2.基因序列
實驗代做服務：
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