蛋白芯片定制檢測服務
實驗技術(shù)簡介:
蛋白芯片是一種高通量監(jiān)測系統(tǒng),通過靶分子和捕捉分子相互作用來監(jiān)測蛋白分子之間的相互作用。捕獲分子--般都預固定在芯片表面,由于抗體的高度特異性和與抗原強結(jié)合特性所以被廣泛的用做捕獲分子。對于研究蛋白芯片的研究在芯片表面有效固定抗體是非常關(guān)鍵的,特別是在固定抗體-致性方面非常關(guān)鍵對于增強蛋白芯片的靈敏度。G蛋白是一種抗體結(jié)合蛋白, 他特意結(jié)合抗體FC片段,因此已被廣泛的用于固定不同類型的抗體。
實驗技術(shù)原理:
蛋白芯片技術(shù)的基本原理是將各種蛋白質(zhì)有序地固定于濾膜、載玻片等各種載體上成為檢測用的芯片。然后,用標記了特定熒光素的抗體或其他成分與芯片反應,經(jīng)清洗將未能與芯片上的蛋白質(zhì)互補結(jié)臺的成分洗去,再利用熒光掃描儀或激光共聚焦掃描技術(shù),測定芯片上各點的熒光強度,通過熒光強度分析芯片上成分與待檢溶液中成分之間相互作用的關(guān)系,由此達到測定目的。
實驗操作流程: .
1、客戶提供生物樣品(抗原或者抗體),驗收。
2、配制點樣液,使用Smartarrayer點樣儀進行點樣。
3、芯片固定,若無后續(xù)實驗,芯片交付客戶。
4、芯片反應實驗。
5、芯片掃描及數(shù)據(jù)分析。芯片清洗后,用LuxScan 10K-A Cy3通道掃描,并提取數(shù)據(jù)進行分析。
6、提供結(jié)果報告(包括雜交圖片、數(shù)據(jù)結(jié)果及相應聚類和差異分析等結(jié)果)。
客戶提供:
1、實驗對象為組織樣品,取適量(50-100mg) 新鮮組織樣品或正確保存的組織樣品,使用
BioPulverizerTM冰凍粉碎組織,加1m的RNA抽提試劑TRIzol (Invitrogen) ,使用Mini-Bead-Beater-16勻漿后抽提RNA。
2、實驗對象為細胞樣品,每份樣品取1x106~ 1x107細胞,加1m的RNA抽提試劑TRIzol (樣品為貼壁細胞,每10cm2培養(yǎng)皿TRIz0I使用量為1ml),裂解后抽提RNA。
交付標準:
1、芯片檢測數(shù)據(jù)
2、完整的實驗操作規(guī)程、實驗報告(含軟件分析結(jié)果)以及實驗材料
實驗代做服務:
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