您好, 歡迎來(lái)到化工儀器網(wǎng)! 登錄| 免費(fèi)注冊(cè)| 產(chǎn)品展廳| 收藏商鋪|
提供商
上海研謹(jǐn)生物科技有限公司資料大小
118.6KB資料圖片
下載次數(shù)
211次資料類(lèi)型
PDF 文件瀏覽次數(shù)
1174次羥自由基清除能力測(cè)定試劑盒說(shuō)明書(shū)
可見(jiàn)分光光度法
注意:正式測(cè)定之前選擇 2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義
羥自由基作用于體內(nèi)蛋白質(zhì)、核酸、脂類(lèi)等生物分子,造成細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能受損,進(jìn)而導(dǎo)致體內(nèi)代謝紊亂引起疾病。羥自由基清除能力是樣品抗氧化能力的重要指標(biāo)之一,在抗氧化類(lèi)
保健品和藥品研究中得到廣泛應(yīng)用。
測(cè)定原理
H2O2/ Fe2+通過(guò)Fenton 反應(yīng)產(chǎn)生羥自由基,將鄰二氮菲- Fe2+水溶液中 Fe2+氧化為Fe3+,導(dǎo)致 536nm吸光度下降,樣品對(duì)536nm吸光度下降速率的抑制程度,反映了樣品清除羥自由基的能力。
自備實(shí)驗(yàn)用品
可見(jiàn)分光光度計(jì)、恒溫水浴鍋、1mL 玻璃比色皿和蒸餾水。
試劑組成和配制
提取液:液體 50 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 8 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 20 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 5 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 5 mL×1 瓶,4℃保存。
樣品的制備
1. 組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱(chēng)取約 0.1g 組織,
加入1mL提取液)進(jìn)行冰浴勻漿,然后 10000g,4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
2. 血清、果汁等液體樣品可直接測(cè)定。
3. 提取物(或者藥物)可配制成一定濃度,如 5 mg/mL。
操作步驟
| 空白管 | 對(duì)照管 | 測(cè)定管 |
試劑一(µL) | 150 | 150 | 150 |
試劑二(µL) | 400 | 400 | 400 |
試劑三(µL) | 100 | 100 | 100 |
立即混勻,防止局部顏色過(guò)濃 | |||
樣品(µL) |
|
| 250 |
試劑四(µL) |
| 100 | 100 |
H2O(µL) | 350 | 250 |
|
混勻、37℃,60min,雙蒸水調(diào)零,測(cè)定 OD 536 |
注意:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次。
計(jì)算公式
羥自由基清除率 D% =(OD測(cè)定管- OD對(duì)照管)÷(OD空白管-OD對(duì)照管)×100%
注意事項(xiàng)
為了比較不同樣品羥自由基清除能力,對(duì)于同一批樣品必須加入等量的樣品,血清、組織勻漿、果汁等液體樣品加入同樣體積,提取物(或者藥物)配制成同樣濃度。
請(qǐng)輸入賬號(hào)
請(qǐng)輸入密碼
請(qǐng)輸驗(yàn)證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),化工儀器網(wǎng)對(duì)此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購(gòu)買(mǎi)風(fēng)險(xiǎn),建議您在購(gòu)買(mǎi)產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。