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獸藥抗生素可以通過藥物生產(chǎn)排放、污水處理排放、處理未使用的或過期的藥物、坡面徑流、施用投喂過抗生素的牲畜的糞便作為肥料等多個方式進(jìn)入環(huán)境，其中，最主要途徑為施用投喂過抗生素的牲畜糞便于農(nóng)田(圖1)

研究發(fā)現(xiàn)，進(jìn)入人類和動物體內(nèi)的抗生素不會被全部吸收，約有30%−90%會隨著尿液或糞便排出。因未被利用和處理，每年約3800噸抗生素被排放到環(huán)境中，其中約46%的抗生素排至水體中，剩余部分則通過農(nóng)業(yè)施肥和污泥回用擴(kuò)散到土壤環(huán)境中。對大多數(shù)畜禽來說，在施藥兩天后能在其排泄物會回收到72%活性成分。四環(huán)素，土霉素，磺胺二甲嘧啶，恩諾沙星，泰樂菌素等獸藥抗生素在豬糞，牛糞，雞糞中普遍地被檢測到，其中四環(huán)素類的排泄率為69%-86%，磺胺類的排泄率為80%-90%，喹諾酮類的排泄率為30%-83.7%，大環(huán)內(nèi)酯類的排泄率為50%-100%。

除了過量使用抗生素所造成的的不良反應(yīng)外，環(huán)境抗生素污染的真正危害在于加劇細(xì)菌耐藥性，會帶來生態(tài)圈和人體不可逆轉(zhuǎn)的損害。因為當(dāng)使用某種抗生素時，總有一些細(xì)菌，對這種抗生素是耐藥的，使用過抗生素以后，對抗菌藥敏感的菌被殺死，但耐藥菌卻“安然無恙”，同時，因為失去了競爭對手，耐藥細(xì)菌會愉快地生長，直至接近或超過之前的水平，繼續(xù)在細(xì)菌、動物和人類之間傳播。而此時再使用之前的抗生素，對這些耐藥菌已經(jīng)沒有作用了。由此可見，本來要殺敵的抗生素卻使敵人變得更加強(qiáng)大，“超級細(xì)菌”由此而生。耐抗生素病原菌的出現(xiàn)，已經(jīng)成為全球公共衛(wèi)生危機(jī)之一。因此研究這類抗生素的污染處理技術(shù)顯得尤為重要，本文以四環(huán)素為例，針對多種樣品中抗生素殘留的前處理提供一站式服務(wù)，旨在為實驗室人員提供更加智能高效的前處理方案。

01  提取

動物源性食品

準(zhǔn)確稱量1.00 g于MHS-60多樣品均質(zhì)系統(tǒng)均質(zhì)后的樣品于50 mL塑料離心管中，向其中EDTA緩沖液8 mL，用MultiVortex多樣品渦旋混合器渦旋1 min，超聲20 min，-2℃1000 rpm離心5 min，收集上清液。殘渣中加入磷酸鹽緩沖液8 mL，重復(fù)提取1次，合并兩次提取液，混勻備用。

植物源性食品

稱取10.0 g于MultiGrinder高通量智能動植物研磨均質(zhì)儀切成碎末的新鮮蔬菜樣品于具塞三角瓶中，加入20 mL 0.02 mol/L氯化鎂-檸檬酸混合溶液于45℃下振蕩提取45 min，過濾，殘渣再用20 mL甲醇重復(fù)提取1次，FlexiVap全自動智能平行濃縮儀揮發(fā)除去甲醇，用5 mL 0.02 mol/L氯化鎂-檸檬酸混合溶液復(fù)溶，與氯化鎂-檸檬酸提取液混合后待過柱凈化富集。

飼料樣品

準(zhǔn)確稱取3.0 g樣品（準(zhǔn)確至0.01 g），置于50 mL具塞錐形瓶中，加入甲醇10 mL，MultiVortex多樣品渦旋混合器旋渦混勻1 min，加入鹽酸溶液30 mL，MultiVortex多樣品渦旋混合器旋渦混勻1 min，超聲20 min，移至50 mL離心管中，5 000 rpm離心10 min，取上清液，待凈化。

土壤樣品

風(fēng)干后的土壤樣品，粉碎機(jī)粉碎后，過60目篩網(wǎng)，準(zhǔn)確稱取15 g過篩網(wǎng)后的樣品，置于iQSE-06智能快速溶劑萃取儀的萃取池中，加20 g硅藻土，以V(甲醇):V(乙腈)=2:1溶劑進(jìn)行提??；提取完畢后，將提取液置FlexiVap全自動智能平行濃縮儀中氮吹至近干(控制溫度45℃)，加1.0 mL甲醇溶解殘渣，MultiVortex多樣品渦旋混合器渦旋1 min后，用0.22 μm濾膜過濾即得，快速溶萃取條件見下表。

表1 快速溶劑萃取條件

化妝品樣品（一般無需凈化）

準(zhǔn)確稱取1 g均勻試樣(精確至0.01 g)，置入50 mL塑料離心管中,加入約20 mL甲醇-草酸溶液(v1：1)，MultiVortex多樣品渦旋混合器渦旋混勻后，用甲酸或氨水調(diào)節(jié)pH至7.0，超聲提取20 min，以4 000 rpm離心3 min。上清液轉(zhuǎn)移至25 mL容量瓶，用甲醇定容。過0.22 μm濾膜，供高效液相色譜儀測定。

02  凈化

各類樣品的凈化均可以用iSPE-864全自動智能固相萃取儀來完成，具體方法如下表所示

方法參考

動物源性食品：GB 31658.17-2021 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 動物性食品中四環(huán)素類、磺胺類和喹諾酮類藥物殘留量的測定 液相色譜－串聯(lián)質(zhì)譜法

植物源性食品：賀德春, 吳根義, 許振成,等. 小白菜和白蘿卜對四環(huán)素類抗生素的吸收累積特征[J]. 農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報, 2014, 33(6):5.

飼料：DB13/T 1384.2-2011 飼料中土霉素、四環(huán)素、金霉素的測定

土壤提?。好? 孫志洪, 張麗. HPLC-MS/MS法測定養(yǎng)殖場土壤中6種常見抗生素微量殘留[J]. 化學(xué)試劑, 2021, 43(7):6.

土壤凈化：NY/T 3787-2020 土壤中四環(huán)素類、氟喹諾酮類、磺胺類、大環(huán)內(nèi)酯類和氯霉素類抗生素含量同步檢測方法 高效液相色譜法

化妝品：SN/T 3897-2014 化妝品中四環(huán)素類抗生素的測定

上述處理方案中使用到的儀器

MultiVortex多樣品渦旋混合器優(yōu)勢

• 高通量 配置多種規(guī)格樣品管

• 高轉(zhuǎn)速應(yīng)對各種難溶樣品

• 可預(yù)存12種渦旋程序

MHS-60 多樣品均質(zhì)系統(tǒng)優(yōu)勢

• 可同時均質(zhì)6個樣品

• 刀頭自動嚙合，噪音小，占地面積小

• 可預(yù)存12種均質(zhì)程序

MultiGrider高通量智能動植物研磨均質(zhì)儀優(yōu)勢

• 三維立體振蕩技術(shù)，進(jìn)行高動能360°撞擊或摩擦

• 智能安全防護(hù)，運行開始后自動鎖緊防護(hù)罩

• 可儲存32種以上研磨均質(zhì)方法和程序提取曲線

iSPE-864全自動智能固相萃取儀優(yōu)勢

• 八通道，可批量處理64個樣品

• 自動完成活化、上樣、淋洗、氮吹、洗脫等全流程

FlexiVap-12/24 全自動智能平行濃縮儀優(yōu)勢

• 氮吹角度自動調(diào)節(jié)（0-90°），先斜吹后直吹

• 同時濃縮12/24個大體積樣品，替代傳統(tǒng)旋蒸 氮吹模式

• 各通道獨立控制，均配備紅外液位傳感器實現(xiàn)精確定容

FV32Plus全自動高通量智能平行濃縮儀優(yōu)勢

• 高通量，最多可以同時處理32個樣品

• 集合針追隨和針渦旋雙模式

• 各通道獨立控制，均配備紅外液位傳感器實現(xiàn)精確定容

• 全自動智能固相萃取儀

  前處理設(shè)備在線詢價
• MGS-24高通量智能動植物研磨均質(zhì)儀

  前處理設(shè)備在線詢價
• MultiVortex多樣品渦旋混合器-12位50ml試管

  前處理設(shè)備在線詢價
• FlexiVap-12全自動智能平行濃縮儀

  前處理設(shè)備在線詢價