磁性3D細胞培養(yǎng)

Greiner Bio-One的磁性3D細胞培養(yǎng)技術(shù)的核心是使用NanoShuttle™-PL對細胞進行磁化。 細胞在磁力作用下聚合，以在體外形成結(jié)構(gòu)和生物學(xué)上典型的3D模型。 NanoShuttle™-PL由金、氧化鐵和聚L-賴氨酸組成。 這些納米顆粒（?~50nm）通過過夜孵育后以靜電力附著在細胞膜上，從而磁化細胞。 孵育后，磁化細胞會布滿深色的納米粒子。NanoShuttle™-PL具有生物相容性，對代謝、增殖和炎癥應(yīng)激均無影響。此外，它不會干擾下游實驗，如熒光染色或Western blotting。

磁化的球狀體在移液時可使用磁力將它們保持在靜止位置，使加液和吸液變得容易，從而避免球狀體的損失。 也可以使用諸如MagPen等磁性工具在容器之間轉(zhuǎn)移球狀體。

磁性細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:

1. 模擬天然的組織環(huán)境

2. 幾小時內(nèi)快速建立3D模型

3. 無需特殊的培養(yǎng)基

4. 易于操作/ 無樣品損失

5. 可實現(xiàn)共培養(yǎng)

磁懸浮培養(yǎng)

磁懸浮是在體外創(chuàng)建天然組織環(huán)境的簡便工具。通過過夜孵育將細胞用NanoShuttleTM-PL進行磁化并分配到具有細胞排斥表面的培養(yǎng)皿或培養(yǎng)板中，在容器上方添加磁力使細胞懸浮。當(dāng)懸浮過程中，細胞從孔底脫離，磁力相當(dāng)于一種不可見的支架，可以迅速聚集細胞，并且促進細胞間的相互作用，誘導(dǎo)ECM合成。磁懸浮法已成功應(yīng)用于制備不同類型細胞的3D培養(yǎng)物，包括細胞系、干細胞和原代細胞。該技術(shù)的基本應(yīng)用是在不同環(huán)境條件下進行3D細胞培養(yǎng)。

磁性生物模印培養(yǎng)（Bioprinting)

與磁懸浮培養(yǎng)不同，磁性3D生物模印技術(shù)是將細胞與NanoShuttleTM-PL孵育過夜后，將微孔板放置在磁體架上，從而將磁化的細胞模印成球狀體。每個孔下方的磁鐵利用溫和的磁力來誘導(dǎo)細胞聚集并在每個孔的底部模印成球狀體。15分鐘至幾小時后，含有球狀體的培養(yǎng)板可以從磁力架上移除并在無磁力的情況下長期培養(yǎng)。 該系統(tǒng)能夠快速形成球狀體，克服了其他平臺的限制因素，并且球狀體的尺寸具有可重復(fù)性，不限制于細胞類型，同時還可以擴展至高通量（96和384孔）。利用磁

性3D生物模印技術(shù)，能模印出結(jié)構(gòu)緊密并可繼續(xù)培養(yǎng)生長的細胞球狀體，可使用商品化的試劑盒持續(xù)檢測促進細胞活性和其他功能。3D模印方法以及商品化的標(biāo)準(zhǔn)試劑盒為高通量化合物篩選提供了理想的組合。然后使用常用的生物學(xué)研究方法進行分析，例如免疫組化和免疫印跡.

環(huán)形磁性模印和成像系統(tǒng)

此外，3D生物打印已被證明可用于開發(fā)新的細胞遷移實驗方法（環(huán)構(gòu)建），這使得動力學(xué)成像可實現(xiàn)自動化，從而實現(xiàn)高通量篩選。 這些實驗方法為篩選化合物對細胞遷移的影響奠定了基礎(chǔ)?；诖判?span style="font-family:helvetica neue">3D生物模印技術(shù)，經(jīng)過NanoShuttle™-PL磁化的細胞被印刷成3D圓環(huán)。在生物模印后，由于細胞的遷移和活性，這些圓環(huán)結(jié)構(gòu)會立即變得緊密并終閉合。使用緊湊型成像套件（帶有iPod *）可以拍攝圓環(huán)的閉合，該套件由免費的應(yīng)用程序（實驗助手）編程，可以以特定間隔對整個板進行成像，從而不需要 再在顯微鏡下進行逐孔檢測。圓環(huán)的收縮通常在24小時內(nèi)完成，圖像可進行批量處理以便快速地 產(chǎn)生毒理學(xué)數(shù)據(jù)。此外，由于圓環(huán)沒有進行標(biāo)簽標(biāo)記，閉合后的環(huán)可用于下游的實驗（免疫組化，免疫印跡，基因組學(xué)等）。