簡介：

產(chǎn)品編號：SJH-033274

產(chǎn)品名稱：科研用小鼠中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)elisa試劑盒

英文名稱：Mouse neutrophil elastase,NE ELISA Kit

檢測樣本：血清、血漿細胞上清液、灌洗液。

檢測方法：雙抗夾心法

樣本體積：50-100ul

規(guī)    格：48T/96T

產(chǎn)    地：中國·青島

產(chǎn)    地：國產(chǎn)/進口

保存條件：2-8℃下,可放置6個月。

產(chǎn)品用途：僅用于科研實驗，嚴禁用于臨床診斷

保存條件：2-8℃環(huán)境中遮光保存。

其他品牌：

試劑類：SIGMA、AMERSCO、TCI、TRC、美國中草藥

血 清：GIBCO、HYCLONE、四季青、MRC

抗 體：ABCAM、SANTA、CST、BD、華美、RD

在售的科研用小鼠中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)elisa試劑盒的產(chǎn)品優(yōu)勢:

1、本品采用天然抗體包被而成，具有特異性強、靈敏度高、操作簡便等特點。

2、部分指標產(chǎn)品采用進口原裝抗體包被，質量放心可靠。

3、可提供免費打代測服務，山東省內(nèi)可上門取樣。

4、一次購買十盒或一個月累計購買十盒可享受經(jīng)銷商提貨價。

5、可為 自測可戶提供全程。

操作舉例：

科研用小鼠中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)elisa試劑盒ELISA的種類很多，不同ELISA的具體操作過程不*相同，但是基本過程是*的。下面以簡潔競爭ELISA測定黃曲霉毒素B1為例，對ELISA的具體操作過程敘述如下。

    抗原包被（antigen coating)將AFB1與牛許晴白蛋白（BSA)的練街舞AFB1-BSA（也可以是卵清蛋白的練街舞AFB1-OV)溶解于0.1mol/L pH9.5的碳酸鹽緩沖液中獎溶液加入酶標板的微孔內(nèi)，通常每孔加200ul，4℃放置過頁，去除恢復至室溫，傾去微孔內(nèi)溶液（包被液），已含有0.05%的TWEEN-20的PH7.0、0.05mol/L磷酸緩沖溶液生理鹽水(PBST)滿孔洗滌3次，每次5min，控干，即得到包被有AFB1-BSA的酶標板。在這個過程中AFB1-BSA通過物理吸附包被（粘附）在酶標板微孔的內(nèi)壁上，沒有包被的抗原被洗滌去除。

    包被抗原的濃度對ELISA的測定結果由較大的影響，濃度過高或過低都會影響測定結果，如下圖是不同包被濃度時，競爭ELISA的抑制曲線。在圖中可以看出，包被濃度對靈敏度的影響較大，當包被濃度為5ug/ml時，靈敏度（zui小檢出量）達1.57ng/ml,其他濃度的靈敏度都比該濃度的差，這說明5ug/ml是叫合適的包被濃度

從宏觀上看，包被濃度無論是過高還是過低都表現(xiàn)為靈敏度差，但是從微觀上分析，他們的情況是不同的，低包被濃度時，包被抗原的量不足，微孔內(nèi)吸附的抗原量少，可供抗體結合的抗原決定簇少，從而影響靈敏度高；二高濃度時包被抗原的量過多，微孔內(nèi)吸附的抗原包被抗原進一步和抗體結合，降低了靈敏度，因此只有合適的包被抗原濃度，才能得到的靈敏度。這種關系見下圖

    科研用小鼠中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)elisa試劑盒的封阻 所謂封阻是指酶標板被抗原包被后，在微孔中加入一定濃度BSA、OV、明膠或脫脂牛奶等溶液以封阻微孔內(nèi)沒有被抗原包被的空襲，避免抗體非特異性吸附于這些空襲，以提高實驗結果的準確性和可靠性，常用的封阻劑包括BSA、OV、明膠和脫脂奶等，其中以脫脂牛奶較為便宜，而且封阻效果和其他幾種封阻劑沒有明顯的差別。

    抗原抗體競爭反應 在酶標板的每個微孔中加入一定量的適當稀釋度的抗體（抗血清），同時分別加入一定量的準溶液用于做標準曲線，混勻，37℃保溫1-2H，包被在酶標板上的固定抗原（AFB1-BSA)和添加的AFB1標準品或樣品抽提液中的AFB1游離抗原競爭抗體的結合位點，PBST洗滌扣干3次，游離的抗原抗體符合無被洗滌去除。

    酶標二抗與抗原抗體復合物的反應 將一定量的適當稀釋的酶標二抗溶液加入個反應孔，37℃保溫1-2h，酶標二抗和抗原抗體符合無反應，形成抗原-抗體-酶標二抗的復合物固定在酶標板上，PBST洗滌扣干5次，將有力多余的酶標二抗去除。

    底物顯色反應和吸光值的測定 每孔加反應底物100ul（40mg臨本二胺溶于100ml、PH5.0/0.2mol/L檸檬酸0.1mol/l磷酸氫鈉緩沖溶液，加入150ul H2O2,現(xiàn)配現(xiàn)用，37℃保溫保濕，避光反應30min，每孔加50ul 2mol/L,H2SO4終止反應，5min后，以酶聯(lián)免疫測定儀于490nm測吸光度。

    科研用小鼠中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)elisa試劑盒Elisa競爭抑制曲線 以AFB1標準誤溶液中的AFB1的濃度對數(shù)為橫坐標，以不同AFB1濃度所對應的吸光值和AFB1濃度為零時吸光值的比值的百分數(shù)（稱為競爭抑制率）為縱坐標，繪制ELISA競爭抑制曲線，根據(jù)樣品抽提液的吸光值，利用競爭抑制曲線，計算出樣品中AFB1的含量，上述ELISA的操作過程

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